TTC染色液的原理及作用:2,3,5-氯化三苯基四氮唑 (TTC)是脂溶性光敏感復(fù)合物,常用于檢測種子的生存能力以及檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,能與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色。正常腦組織和有活力種子胚組織活細(xì)胞中的脫氫酶可以將TTC還原成不溶性的紅色穩(wěn)定的三苯基甲臢(TTF),如果腦組織細(xì)胞或胚種細(xì)胞死亡或生活力衰退,則不能染色或染色較淺。因此可以根據(jù)染色部位和染色深淺程度來鑒定腦組織或者種子的活力。
結(jié)果判斷:
正常組織被染成紅色,腦梗死區(qū)不被染色。
TTC染色液的優(yōu)點:
① 方法簡便易行。取材于新鮮組織, 方便易行;而常規(guī) HE 染色則需要固定及包埋標(biāo)本, 并且經(jīng)切片后才能染色。
② 節(jié)省時間。TTC 染色的全過程約 15~30min,遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于 HE 染色。
③ 所需儀器設(shè)備簡單。與 HE 染色所需的切片機(jī)、包埋盒等相比,TTC 染色幾乎不需要特殊的實驗器材。
④ TTC染色液可重復(fù)使用。在 3 天時間內(nèi),10 ml 的 TTC 染液可重復(fù)使用 2~3 次,大約能染 18 張切片。
注意事項:
1.TTC溶液若變成紅色則不可再用。
2.顯色時要使組織切片全部浸入TTC染色液中。
3.TCC染色后應(yīng)立即觀察,不可久放。
4.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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