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            大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒?操作步驟

            來(lái)源:上海研生實(shí)業(yè)有限公司   2022年12月22日 11:22  

            大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒操作步驟:

            1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

            2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

            3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

            4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

            5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

            6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

            7. 溫育:操作同3。

            8. 洗滌:操作同5。

            9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

            10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

            11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

            NA平板(加青霉素酶)(9cm)10個(gè)/包細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用

            Nutrient Agar

            CIN-1瓊脂平板(9cm)10個(gè)/包用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌

            CIN-1 Agar

            含青霉素酶TSA培養(yǎng)基平板(7cm)10個(gè)/包用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無(wú)菌檢測(cè)

            Tryptose Soya Agar

            含青霉素酶接觸皿培養(yǎng)基平板(6.5cm)10個(gè)/包用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無(wú)菌檢測(cè)

            Contact Plate Medium

            TSA培養(yǎng)基平板(9cm)10個(gè)/包用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無(wú)菌檢測(cè)

            TSA

            RODAC培養(yǎng)皿(TSA)(6.5cm)10個(gè)/包用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無(wú)菌檢測(cè)

            RODAC

            改良Skirrow氏瓊脂平板(9cm)10個(gè)/包用于彎曲桿菌的分離培養(yǎng)

            Modified Skirrow Agar

            甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂平板(9cm)10個(gè)/包用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計(jì)數(shù)

            Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base

            BCYE-CYS瓊脂平板(9cm)10個(gè)/包用于軍團(tuán)菌的選擇性分離培養(yǎng)

            BCYE-CYS Agar

            改良CCDA瓊脂平板(9cm)10個(gè)/包用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)

            Modified CCDA Agar

            酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂(YPD)平板9cm*10/包用于測(cè)定酵母菌總數(shù)

            菌種保存和即用型運(yùn)送培養(yǎng)基

            瓷珠菌種保存管(20支)20支/盒用于菌種保存(瓷珠法)

            Strain Store Medium


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