1、 血清管細胞在常溫運送到達后,請在收到細胞后,先檢查包裝是否完整,有無破損漏液的情況,并核對細胞管上的標簽信息,細胞管數(shù)是否與發(fā)貨清單一致。如有異常情況,請及時與我們聯(lián)系。
2、收到細胞后請盡快進行處理,如不能及時處理,請將細胞放至常溫環(huán)境,通常15-25℃為佳,并盡量在24 h內完成實驗。否則細胞狀態(tài)和存活率將會受到一定的影響。血清管懸液可能會呈現(xiàn)一定程度的渾濁狀態(tài),這屬于正?,F(xiàn)象,請放心操作。
3、將血清管外壁進行常規(guī)消毒后,在超凈臺內小心開蓋,盡量避免氣泡溢出,輕柔吹打數(shù)次,轉移至15 mL離心管內。
4、吸取1 mL培養(yǎng)基清洗血清管內壁,同樣轉移至15mL管,并吹打均勻。
5、取20 μL細胞懸液至EP管,臺盼藍染色并計數(shù),記錄細胞數(shù)量和存活率。如有異常請及時與我們聯(lián)系。
6、250 g離心4 min,收集細胞沉淀,并接種至合適大小的培養(yǎng)器皿中,放置于培養(yǎng)箱內進行培養(yǎng)。
7、24 h后顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),觀察細胞時請拍100×、200×各2-3張照片進行留存,所拍照片應該盡量清晰。,并根據(jù)匯合度繼續(xù)培養(yǎng)或消化傳代。
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