1、接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張) 。

2、用75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開外包裝。

3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

4、細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。

5、1000rpm, 5min離心，用吸管小心吸出上清，加入培養(yǎng)基,重懸細(xì)胞。

1、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種,加入新鮮培養(yǎng)基,置于37C, 5%CO2 培養(yǎng)(大部分細(xì)胞)

培養(yǎng)操作:細(xì)胞培養(yǎng)操作指南

細(xì)胞常見問題分析:細(xì)胞培養(yǎng)常見問題分析

細(xì)胞在發(fā)貨前進(jìn)行質(zhì)檢:

1、細(xì)胞存種的活性檢測(cè)

2、細(xì)菌、真菌、霉菌污染物鏡檢

3、衣原體、支原體檢測(cè)(熒光法、培養(yǎng)法等)

產(chǎn)品質(zhì)量保證及售后:

1、細(xì)胞為三代以內(nèi)， 活體。運(yùn)輸過程中細(xì)胞出現(xiàn)污染和狀態(tài)不好,我們*免費(fèi)重新發(fā)貨。

2、實(shí)驗(yàn)過程中若確定是客戶問題 ,客戶僅需支付物流和耗材費(fèi)用，我們可重新發(fā)貨。其他根據(jù)情況靈活處理。

3、產(chǎn)品使用過程中， 可提供技術(shù)上的指導(dǎo)。

使用方法：

PANC1人胰腺癌細(xì)胞

一,燒瓶培養(yǎng)的處理程序

在培養(yǎng)瓶中接種細(xì)胞并在培養(yǎng)基中*填充培養(yǎng)基以防止運(yùn)輸過程中細(xì)胞的丟失。

1、收到后，日視檢查培養(yǎng)物旱否有微牛物污邊的宏觀證據(jù)。

使用倒置顯微鏡(配備有相位傳感器)，仔細(xì)檢查是否有微生物污染的證據(jù)。還檢查以確定大多數(shù)細(xì)胞是否仍然附著在燒瓶底部?在運(yùn)輸過程中，培養(yǎng)物有時(shí)被粗略地處理，并且許多細(xì)胞經(jīng)常分離并懸浮在培養(yǎng)基中(但仍然是可行的)。

2、如果細(xì)胞仍然附著,無菌去除5至10毫升的運(yùn)輸介質(zhì)?？梢怨?jié)省運(yùn)輸媒介以重復(fù)使用。在5%C的空氣中，在37C下培養(yǎng)細(xì)胞，直到它們準(zhǔn)備進(jìn)行

二、傳代程序

體積為75厘米的燒瓶。增加或減少其他尺寸培養(yǎng)容器所需的分離培養(yǎng)基的量。

1、去除和丟棄培養(yǎng)基。

2.用0.25%(w/v)胰蛋白酶0.53mM EDTA溶液沖洗細(xì)胞層，除去所有含有胰蛋白酶抑制劑的血清痕跡。

3.添加2.0~3.0 ml胰酶EDTA溶液瓶中，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞到細(xì)胞層分散(取決于胰蛋白酶的批)。

注意:為了避免結(jié)塊,不要在擊打或搖晃瓶子時(shí)攪拌細(xì)胞，等待細(xì)胞分離。難以分離的細(xì)胞可以放置在37°以促進(jìn)擴(kuò)散。

4、加入6~8毫升的完整生長(zhǎng)培養(yǎng)基,輕輕吸液，抽吸細(xì)胞。

5、在新培養(yǎng)容器中加入適當(dāng)?shù)募?xì)胞懸液等分試樣。

6、培養(yǎng)37°C培養(yǎng)基。

推薦裁培比為1:3: 1:4。

介質(zhì)更新:每周2至3次