快速轉(zhuǎn)膜液是一種高達20倍濃度的高效轉(zhuǎn)膜液,用于WesternBlot濕轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)膜,能高效快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜(PVDF或硝纖膜)上。不使用甲醇,能在15-30分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)膜過程。
產(chǎn)品特色:
1、高效安全:不使用甲醇,減少有毒試劑使用。
2、快速穩(wěn)定:能在15-30分鐘完成轉(zhuǎn)膜過程,產(chǎn)熱量小,減少蛋白損失。
3、兼容性好:兼容Laemmli膠,預(yù)制膠,F(xiàn)astPAGE,Bis-Tris膠等多種凝膠。
快速轉(zhuǎn)膜液操作步驟:
1、1X快速轉(zhuǎn)膜液的配制(1000ml):取50ml快速轉(zhuǎn)膜液(20X)+850ml去離子水+100ml無水乙醇。
2、做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu),然后轉(zhuǎn)移至電泳槽中,設(shè)定恒流400mA,電泳時間25-30分鐘完成蛋白轉(zhuǎn)膜。
快速轉(zhuǎn)膜液使用要注意:
(1)PVDF膜使用前要用無水甲醇潤濕30秒以上。
?。?)轉(zhuǎn)印電流建議設(shè)定恒流400mA,一般25-30分鐘可以將150kD以下蛋白可以轉(zhuǎn)??;小于100kD蛋白20分鐘即可可以轉(zhuǎn)印;對于大于150kD蛋白,建議延長5-10分鐘。
?。?)凝膠的濃度影響轉(zhuǎn)印的效率,對于膠濃度7.5%,20分鐘即可完成轉(zhuǎn)印;對于膠濃度10%,25-30分鐘即可完成轉(zhuǎn)??;對于膠濃度大于10%,建議延長5-10分鐘
?。?)40分鐘時間內(nèi)轉(zhuǎn)膜不需要放冰上,轉(zhuǎn)膜槽內(nèi)外都不可放冰預(yù)冷,否則會影響效率。
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