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超高效液相色譜的理論基礎(chǔ)為范德米特(VanDeemeter)方程。HETP=AdP+B/v+CdP2v式中:HETP為理論塔板高度;A為渦流擴(kuò)散系數(shù);dP為填料粒徑;B為分子徑向擴(kuò)散系數(shù);C為傳質(zhì)因子;v為流動(dòng)相線速度。由該方程可得出結(jié)論:顆粒度越小柱效越高;每個(gè)顆粒度尺寸有自己的最佳柱效的流速;更小的顆粒度使最高柱效點(diǎn)向更高流速(線速度)方向移動(dòng),而且有更寬的線速度范圍。所以降低顆粒度不但提高柱效,同時(shí)也提高速度。但是,應(yīng)當(dāng)看到在使用小顆粒的固定相時(shí),會(huì)使$p大大增加,使用更高的流速會(huì)受到固定相的機(jī)械強(qiáng)度和色譜儀系統(tǒng)耐壓性能的限制。然而,只要使用很小粒度的固定相,并且只有在達(dá)到最佳線速度時(shí),其具有的高柱效和快速分離的特點(diǎn),才能顯現(xiàn)出來(lái)。因此要實(shí)現(xiàn)超高效液相色譜分析,除必須制備出裝填粒度小于2Lm固定相的色譜柱外,還必須提供高壓溶劑輸送單元、低死體積的色譜系統(tǒng)、快速的檢測(cè)器、快速自動(dòng)進(jìn)樣器和高速數(shù)據(jù)采集、控制系統(tǒng)等。上述幾個(gè)最新成果的組合,才促成超高效液相色譜的實(shí)現(xiàn)。
如今，超高效液相色譜儀主要應(yīng)用于：
1.藥物分析如天然產(chǎn)物中復(fù)雜組分的分析
2.生化分析如蛋白質(zhì)、多肽、代謝組學(xué)等生化樣品
3.食品分析如食品中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)
4.環(huán)境分析如水中微囊藻毒素的檢測(cè)
5.其他如化妝品中違禁品的檢測(cè)
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