利用ELISA試劑(免疫吸附測定)進(jìn)行檢測的樣本類型包括常見的血液(血清、血漿),組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清以及不常見的皮膚組織、尿液、糞便、肺泡灌洗液、唾液、腦脊液、胸腹水等,這些樣本收集的時間、處理方法和保存都會影響到ELISA實驗的結(jié)果。下面對常見組織樣本處理方法整理,希望對您有所幫助。
組織樣本一般是制成組織勻漿,處理方法如下:
取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(02mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
可同時選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入 5-10ml預(yù)冷PBS(組織與 PBS 的質(zhì)量體積比建議為 1:5,即1g 樣本加入 5ml PBS)進(jìn)行充分研磨(有條件實驗室可選用機(jī)器勻漿),該過程需在冰上進(jìn)行;得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù) 2 次)。
將制備好的勻漿液于5000×g 離心5分鐘,留取上清即可檢測。
如果樣本需要長期保存,請?zhí)砑拥鞍酌敢种苿?。根?jù)實驗需要,組織勻漿樣本可先定量總蛋白,以便于統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)。某些組織樣本如肝臟,腎臟,腦組織會有假陽性反應(yīng)。
樣本保存:
ELISA試劑處理樣本的過程就是收集目標(biāo)蛋白的過程,由于蛋白容易變性,降解,故該過程應(yīng)盡量溫和。樣本處理之后的儲存也非常重要,尤其注意不要反復(fù)凍融,樣本處理之后可分裝密封保存,4℃保存應(yīng)小于 1 周,-20℃不應(yīng)超過 1 個月,-80℃不應(yīng)超過2個月。在標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫,不應(yīng)加熱使之融解。
以上是上海研域生物就ELISA試劑樣本篇常見樣本組織解析,望對您的科研事業(yè)盡綿薄之力!
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。