GUS染色液(即用型)
產(chǎn)品貨號(hào):R21987
產(chǎn)品規(guī)格:25ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
X-Gluc(X-GlcA)分子量為521.8,CAS號(hào)為18656-96-7,是檢測(cè)大腸桿菌GUS基因的底物,可快速檢測(cè)植物中GUS基因融合標(biāo)記。GUS染色液在適宜的反應(yīng)條件下,β-葡萄糖苷酶(GUS)可將X-Gluc水解成藍(lán)色物質(zhì),該物質(zhì)不溶解于轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞核組織中的靛藍(lán)物質(zhì),具有GUS活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn),可用肉眼或顯微鏡觀察到。GUS染色液多用于轉(zhuǎn)基因植物的GUS基因表達(dá)分析。
產(chǎn)品組成:
名稱(chēng) | 10ml | 25ml | 50ml | 保存條件 |
試劑(A): X-Gluc Solution(50×) | 0.2ml | 0.5ml | 1ml | -20℃避光 |
試劑(B): GUS Buffer | 10ml | 25ml | 50ml | 2-8℃避光 |
操作步驟(僅供參考):
1. 配制X- Gluc 染色液:取適量X-Gluc Solution(50×)和GUS Buffer,按1:50比例充分混勻,配制成X- Gluc 染色液,如取200ul X-Gluc Solution(50×)加入到10ml GUS Buffer中,即配成10ml GUS染色液,該染色液最好現(xiàn)配現(xiàn)用,短期可4℃保存3d。
2. 取適量待染液片等組織加入適量GUS染色液,使GUS染色液wan全浸沒(méi)組織。
3. 37℃孵育1-24h。隨著孵育時(shí)間的延長(zhǎng),藍(lán)色漸漸出現(xiàn),當(dāng)表達(dá)量較高時(shí),GUS活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn)。
4. 用70%乙醇脫去樣本的葉綠素,一般樣本浸沒(méi)于乙醇1-3h,至陰性對(duì)照呈白色。如有必要可重復(fù)該脫色步驟,以便che底清除葉綠素。樣本保存于乙醇中,可用肉眼或普通光學(xué)顯微鏡下觀察,白色背景上的藍(lán)色即為GUS表達(dá)位點(diǎn)。
注意事項(xiàng):
1. 配制好的GUS染色液可以4℃避光保存3d。
2. X-Gluc Solution(50×)應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則染色效率會(huì)下降。
3. 由于組織特異性等原因,藍(lán)色顏色反應(yīng)可能不wan全一致,應(yīng)注意摸索具體實(shí)驗(yàn)條件。擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片(1-3mm)。當(dāng)操作大的組織和樣品時(shí),可以選用真空滲入法來(lái)幫助底物滲入細(xì)胞,建議使用GUS染色液。
4. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
保存條件:
-20℃保存, 6個(gè)月有效。
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