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大腸桿菌(Escherichia coli)，簡稱E.coli，是一種常見的革蘭氏陰性菌，人和動物的腸道中都存在大量的大腸桿菌。在生命科學(xué)研究中，被廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)、蛋白質(zhì)表達(dá)和酶反應(yīng)等方面。下面介紹一下它的使用方法。
1.制備大腸桿菌培養(yǎng)基
制備培養(yǎng)基是培養(yǎng)它不可少的步驟。選取適合其生長的培養(yǎng)基，在按比例混合后進(jìn)行濾器滅菌。常用的培養(yǎng)基有Luria-Bertani（LB）培養(yǎng)基、M9培養(yǎng)基、超優(yōu)培養(yǎng)基等。其中LB培養(yǎng)基最為常用，制備簡單易行，成本較低。
2.取樣并接種
在培養(yǎng)前，需要從凝膠管上提取培養(yǎng)物，并加入到含有培養(yǎng)基的瓶子中進(jìn)行接種。接種時(shí)可以選擇移液管或者注射器等工具，注意操作過程中要消毒清洗。
3.培養(yǎng)條件
其生長條件相對較為寬泛。通常在37度下培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求可長達(dá)數(shù)天。培養(yǎng)過程中要注意無菌操作、瓶蓋勿開、顛倒培養(yǎng)等。
4.分離純化
大腸桿菌是一種腸道菌群以下（通量） 的微生物，所以在培養(yǎng)過程中很容易出現(xiàn)雜菌。在進(jìn)行特定實(shí)驗(yàn)時(shí)需要凈化大腸桿菌。此時(shí)可以通過法拉第籠或者摸板法等方法進(jìn)行篩選和分離。
5.儲存
保藏溫度通常是-80度冷凍庫，若要長期保存，也可以使用甘油溶液預(yù)冷卻后進(jìn)行長期保存。
總之，大腸桿菌的使用方法包括制備培養(yǎng)基、取樣接種、培養(yǎng)條件、分離純化和儲存。希望本篇文章可以對大家在實(shí)際操作中有所幫助。
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