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            馬血清給特別滴細(xì)胞特別滴“愛(ài)”

            來(lái)源:愛(ài)必信(上海)生物科技有限公司   2023年05月05日 10:35  

            大家都知道,胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)界的“香餑餑”,備受胞胞們的“寵愛(ài)”,其實(shí)還有一個(gè)“香煎餅”,大家可知道?對(duì)一些“挑食”的細(xì)胞,馬血清可謂是散發(fā)著一股“煎餅的清香”。


            圖1 馬血清優(yōu)級(jí)(abs989)

            一、馬血清的第一大功能是“滋養(yǎng)”一些特別的細(xì)胞,如免疫細(xì)胞類(lèi)、成纖維細(xì)胞類(lèi)、上皮細(xì)胞類(lèi)、神經(jīng)細(xì)胞類(lèi)等。需要添加馬血清的常見(jiàn)細(xì)胞類(lèi)型如下:

            1)NK(人外周血自然殺傷細(xì)胞)和NK-92(人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞)

            營(yíng)養(yǎng)體系:74% α-MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基(abs9506)+ 0.2mM Inositol(abs816057)+ 0.1mM β-mercaptoethanol(abs9592)+ 0.02mM Folic Acid(abs812845)+ 100-200U/mL recombinant IL-2(abs04045)+ 12.5 %馬血清優(yōu)級(jí)(abs989+ 12.5% 胎牛血清優(yōu)級(jí)(abs972)+ 1% 雙抗(abs9244)

            2)EL-4(小鼠胸腺淋巴瘤細(xì)胞)

            營(yíng)養(yǎng)體系:89% DMEM高糖基礎(chǔ)培養(yǎng)基(abs9483)+ 10% 馬血清優(yōu)級(jí)(abs989+ 1% 雙抗(abs9244)

            3)L929(小鼠成纖維細(xì)胞)和CRFK(貓腎細(xì)胞)

            營(yíng)養(yǎng)體系:89% MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基(abs9503)+ 10% 馬血清優(yōu)級(jí)(abs989+ 1% 雙抗(abs9244)

            4)MCF 10A(人正常乳腺上皮細(xì)胞)

            營(yíng)養(yǎng)體系:94% DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基(abs9561)+ 5% 馬血清(abs989+ 1% 雙抗(abs9244)+ 20ng/ml EGF(abs04176)+ 0.5ug/ml 氫化可的松Hydrocortisone(abs814512)+ 100ng/ml 霍亂霉素choleratoxin+10ug/ml 胰島素insulin(abs42225219)

            5)PC-12(Undifferentiated)(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化))

            營(yíng)養(yǎng)體系:79% RPMI1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基(abs9484)+ 15% 馬血清(abs989+ 5% 胎牛血清優(yōu)級(jí)(abs972)+ 1% 雙抗(abs9244)

            二、馬血清第二大功能是誘導(dǎo)分化作用,有文獻(xiàn)報(bào)道【1】馬血清在 5-氮雜胞苷誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞成肌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)揮重要作用

            該研究如下:將第1代長(zhǎng)滿(mǎn)100 mm培養(yǎng)皿的脂肪干細(xì)胞傳代至3個(gè)6孔板,實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基中加入體積分?jǐn)?shù)為 5% 馬血清 +10 μmol/L 5-氮雜胞苷;對(duì)照組培養(yǎng)基中單純添加 10 μmol/L 的 5-氮雜胞苷;空白組為單純低糖 DMEM 培養(yǎng)基,其余培養(yǎng)、傳代及鑒定所需的條件相同。每日光鏡觀察記錄形態(tài),在培養(yǎng)的第 7、14、28、35 天行免疫熒光和流式細(xì)胞儀檢測(cè)肌蛋白表達(dá)差異。

            該文獻(xiàn)的結(jié)果與結(jié)論是免疫熒光檢測(cè)成肌特異性胞質(zhì)蛋白表達(dá)以及流式細(xì)胞檢測(cè)相應(yīng)蛋白表達(dá)率提示,加入馬血清后的實(shí)驗(yàn)組脂肪干細(xì)胞的成肌速度和誘導(dǎo)成肌所需時(shí)間明顯比單純加入 5-氮雜胞苷的對(duì)照組更有優(yōu)勢(shì)。實(shí)驗(yàn)初步表明馬血清在促進(jìn)脂肪干細(xì)胞誘導(dǎo)成肌方面起著縮短誘導(dǎo)成肌所需時(shí)間的作用。

            同時(shí),馬血清在誘導(dǎo) C2C12(小鼠成肌細(xì)胞)分化為多核肌管方面也發(fā)揮重大作用。C2C12 細(xì)胞是由 D·Yaffe 和 O·Saxel 建立的小鼠成肌細(xì)胞株的亞克??;該細(xì)胞分化很快,形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。將狀態(tài)良好的骨骼肌細(xì)胞以 0.9×105 接種在96孔板上(每孔100ul),置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24h 后,待細(xì)胞融合到 70-80% 后,更換成的含有 2% 馬血清的培養(yǎng)基中,進(jìn)行誘導(dǎo)分化。(如圖2所示)


            圖3 C2C12(小鼠成肌細(xì)胞)向多核肌管方向分化

            另外,也有文獻(xiàn)報(bào)道【2】傳代培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(P3)在 20% 馬血清的 L-DMEM 培養(yǎng)液中可分化為脂肪細(xì)胞。

            此外, 10% 馬血清可代替 FBS 用于支持綿羊紅細(xì)胞的體外抗體應(yīng)答; 血清 IgG 制備,白蛋白的提取及生物活性研究;免疫組化(IHC)、酶聯(lián)免疫ELISA)等免疫實(shí)驗(yàn)的封閉劑。


            參考文獻(xiàn)


            【1】劉杰,傅強(qiáng).馬血清在脂肪干細(xì)胞成肌誘導(dǎo)中的作用[J].中國(guó)組織工程研究, 15(14)

            【2】趙文靜,陳亞潔,劉薇.人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志.2006.16(18):2744-2747


            本期講解就到這里了,如有細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題,歡迎微信公眾號(hào)后臺(tái)留言~


            注:圖源網(wǎng)絡(luò)和客戶(hù),僅供參考學(xué)習(xí)用

            表 細(xì)胞培養(yǎng)類(lèi)產(chǎn)品推薦

            貨號(hào)

            品名

            規(guī)格

            abs981

            胎牛血清(特級(jí))

            500ml

            abs972

            胎牛血清(優(yōu)級(jí))

            500ml

            abs974

            胎牛血清(標(biāo)準(zhǔn)級(jí))

            500ml

            abs9483

            高糖DMEM培養(yǎng)基

            500ml

            abs9484

            RPMI-1640培養(yǎng)基

            500ml

            abs9505

            MEM培養(yǎng)基

            500ml

            abs9506

            α-MEM培養(yǎng)基

            500ml

            abs9554

            Ham's F-12培養(yǎng)基

            500ml

            abs9563

            Ham's F-12K培養(yǎng)基

            500ml

            abs9561

            DMEM/F-12培養(yǎng)基

            500ml

            abs962

            PBS緩沖液

            500ml

            abs970

            D-PBS緩沖液(不含 Ca2+ Mg2+

            500ml

            abs971

            D-PBS緩沖液(含 Ca2+ Mg2+)

            500ml

            abs9257

            Hanks平衡鹽溶液(不含 Ca2+ Mg2+)

            500ml

            abs9258

            Hanks平衡鹽溶液(含 Ca2+ Mg2+)

            500ml

            abs47014938

            胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) ,含酚紅

            100ml

            abs47047375

            胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%),不含酚紅

            100mL

            abs9479

            無(wú)DMSO無(wú)血清細(xì)胞凍存液

            100mL

            abs9417

            無(wú)血清細(xì)胞凍存液

            100mL

            abs9473

            細(xì)胞凍存液(含血清)

            100mL

            abs9474

            組織保存液

            100ml

            abs9480

            組織凍存試劑盒

            30ml

            abs9486

            模具

            1個(gè)/套

            abs9487

            小刀

            5片/包

            abs9481

            組織復(fù)蘇試劑盒

            50ml

            abs42020125

            卡那霉素B硫酸鹽

            250mg

            abs42018967

            硫酸慶大霉素溶液

            10ml

            abs9244

            青鏈雙抗

            100ml

            abs9245

            青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液

            100ml

            abs42013298

            兩性霉素B

            1g

            abs44071148

            制霉菌素

            1g

            abs9246

            青霉素-鏈霉素-兩性霉素B混合溶液

            100ml

            abs9252

            支原體檢測(cè)試劑盒

            100T

            abs9375

            支原體清除試劑

            200uL×5

            abs9376

            支原體預(yù)防

            500uL×4

            abs816578

            環(huán)丙沙星鹽酸鹽

            500mg

            abs9374

            水盤(pán)抑菌劑

            20ml

            abs9371

            水浴鍋抑菌劑

            100ml

            abs9372

            培養(yǎng)箱除菌劑

            480ml

            abs9373

            細(xì)胞房除菌劑

            480ml

             

             

            Absin特色產(chǎn)品線:

            WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動(dòng)劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體;定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...

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