單光束型主要是依賴單束光進(jìn)行測量。一束給定波長的光通過對(duì)照物,然后再通過實(shí)際樣品溶液,就能得到吸光結(jié)果。
雙光束型則是通過一個(gè)斬光輪(mirrored chopper wheel)將一束光分成兩束,分別測量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品??梢宰钚』馄疲╨amp drift)和減少測量時(shí)間。一些雙光型光度計(jì)不利用斬光輪,而是利用一種光束分光器來代替,將一束光分成兩束平行的光然后同時(shí)測量對(duì)照樣品和目的樣品。因?yàn)樵黾恿藴y量的速度,所以雙光束分光光度計(jì)在測量一些溶液隨時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的研究中大有用處。
至于單雙光束的紫外可見分光光度計(jì)各有什么優(yōu)缺點(diǎn),簡單對(duì)比如下:
1、單光束UV:傳統(tǒng)的紫外,單光源發(fā)射單光束,全程密閉,通過光柵,照射樣品,最后由光電倍增管監(jiān)測器檢測。
缺點(diǎn):測完空白再測試樣品,全波段分析時(shí)間較長(一般2min)。
2、比例雙光束UV:單光源單光束,全程密閉,通過光柵,加入棱鏡,把光分為兩束,分別照射樣品與空白,再合并光,進(jìn)入光電倍增管檢測器,通過差減法計(jì)算結(jié)果。
好處:空白樣品同時(shí)檢測。
缺點(diǎn):靈敏度下降,全波段分析時(shí)間較長。
3、雙光束UV:單光源單光束,全程密閉,通過棱鏡分出兩道光,分別通過一光柵,分別進(jìn)入各自的光點(diǎn)倍增管檢測器。
好處:加強(qiáng)靈敏度,同時(shí)測量空白與樣品。
缺點(diǎn):全波段分析時(shí)間較長。
4、全波段UV:單光源單光束,樣品與空白暴露在空氣中,照射樣品,開始進(jìn)入密閉箱,通過光柵,進(jìn)入DAD檢測器。
好處:空白只需要檢測一次,如果你愿意一輩子檢測這一次都可以。檢測樣品不密閉,外界光線對(duì)其無影響,使用方便且精確。分析任何波段或全波段不到1s。
缺點(diǎn):貴。
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