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凝膠凈化是一種常用的蛋白質(zhì)純化方法，它能夠快速、簡便地將目標(biāo)蛋白質(zhì)從復(fù)雜混合物中分離出來。而凝膠凈化儀則是具體實(shí)現(xiàn)凝膠凈化過程的設(shè)備。
一、凝膠凈化原理
凝膠凈化是依靠分子量篩選效應(yīng)來進(jìn)行蛋白質(zhì)純化的。在凝膠中，由于其空間結(jié)構(gòu)和酸堿度等因素的影響，不同大小的蛋白質(zhì)會在凝膠孔道中移動速度不同，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)分離的效果。
二、凝膠凈化儀主要由電泳槽、電源、恒溫裝置和收集系統(tǒng)等部分組成。其中電泳槽是核心的部件，它包含了凝膠制備和電泳兩個步驟。
1.凝膠制備
凝膠制備通常使用聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠。其中，聚丙烯酰胺凝膠是目前應(yīng)用廣泛的凝膠材料之一。在制備聚丙烯酰胺凝膠時，需要將單體丙烯酰胺、交聯(lián)劑N,N'-甲撐二丙烯酰胺和過硫酸銨等混合后進(jìn)行聚合反應(yīng)。通過控制單體與交聯(lián)劑的比例和加入過硫酸銨的量等因素，可以調(diào)節(jié)凝膠孔徑和網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，從而實(shí)現(xiàn)對不同大小蛋白質(zhì)的篩選分離。
2.電泳
凝膠制備好后，就可以進(jìn)行電泳操作了。在電泳過程中，需要將樣品溶液注入凝膠上方的樣品槽中，并將電極插入兩端，接通電源。此時，電場作用下，帶電粒子（包括帶電的DNA、RNA或蛋白質(zhì)）會向電極方向移動，根據(jù)其大小進(jìn)行分離。
三、凝膠凈化儀的優(yōu)點(diǎn)：
（1）具有高效性：能夠快速地將目標(biāo)蛋白質(zhì)從復(fù)雜混合物中分離出來。
?。?）靈敏度高：能夠檢測到非常微小的蛋白質(zhì)量，并進(jìn)行準(zhǔn)確的分離。
?。?）純度高：能夠?qū)⒛繕?biāo)蛋白質(zhì)從復(fù)雜混合物中高效地純化出來，并且不會受到其他成分的干擾。
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