PD-1和CTLA-4在很多腫瘤中是共表達的，而且利用了TIL（腫瘤浸潤淋巴細胞）與外周血淋巴細胞中PD-1/CTLA-4共表達的差異，使得這款新藥只富集在腫瘤微環(huán)境中，減少了傳統(tǒng)免疫治療的毒副作用問題?？鼓[瘤效應更特異還有一個可能原因是這款藥物可以連接特異表達PD-1或CTLA-4的腫瘤細胞。

為了驗證親合力提高，作者使用Octet® 設計了一個實驗：

將高濃度的PD1和CTLA4進行1：1混合，固化信號比較高（圖2a）;或者用低濃度固化，使得固化信號比較低（圖2b），然后分別與四價的C藥和兩價的AK105（penpulimab）結合，發(fā)現(xiàn)高密度的C藥的親和力比低密度的高一個數(shù)量級，而AK105則沒有明顯的變化。

圖4：Octet® 實驗證明C藥可以提高親合力

圖5：Octet® 結果顯示，C藥剔除了Fc受體以及C1q的結合活性，F(xiàn)c受體固化在HIS1K傳感器上與抗體進行結合解離；C1q實驗則是固化抗體，與C1q進行結合解離

目前，除了已經(jīng)獲批用于宮頸癌治療之外，該藥還在新的適應癥進行臨床試驗，其中胃癌和肝癌已經(jīng)走到了III期。

圖6：C藥的臨床適應癥布局（數(shù)據(jù)來自于康方）

該藥物的藥理實驗中的Fc受體親和力、抗原抗體親和力以及結合特異性實驗中均用到了賽多利斯的Octet® 非標記分子互作系統(tǒng)。陳老濕記得康方第一臺Octet® 于2012年安裝，一直用Octet® 測親和力10余年，足以說明其數(shù)據(jù)的可靠性與穩(wěn)定性。

Octet® 依賴的生物層干涉技術也是美國藥典中用于檢測親和力的方法之一。

Octet® 在藥物研發(fā)中的優(yōu)勢：

• 非標記Direct Binding是趨勢，結果更準確

• 快速測定親和力，更加定量化地表征分子互作

• 通量高，使用檢測，測試速度快，可以縮短研發(fā)周期

• 應用多，包括親和力測定，EC50，濃度測試，從早期的親和力排序、表位分組到后期的細胞株開發(fā)，工藝開發(fā)的殘留物測試等應用都可以涵蓋

• 用戶多，文章多，認可度廣

• 萬金油技術，可以用與檢測DNA，小分子，蛋白質(zhì)等各種生物分子

• 操作簡便，耗材及維護成本低

-參考文獻-

[1] Cadonilimab, a tetravalent PD-1/CTLA-4 bispecific antibody with trans-binding and enhanced target binding avidity. MABS 2023, VOL. 15, NO. 1, 2180794