BCA(bicinchonininc acid)與二價(jià)銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的 試劑 ,混合一起即成為蘋果綠,即BCA工作試劑。在堿性條件下,BCA與蛋白質(zhì)結(jié)合時(shí),蛋白質(zhì)將Cu2+ 還原為Cu+ ,一個(gè)Cu+ 螯合二個(gè)BCA分子,工作試劑由原來的蘋果綠形成紫色復(fù)合物,最大光吸收強(qiáng)度與蛋白質(zhì)濃度成正比。
優(yōu)缺點(diǎn)
1. 操作簡單,快速,45分鐘內(nèi)完成測定,比經(jīng)典的Lowary法快4倍且更加方便;
2.準(zhǔn)確靈敏,試劑穩(wěn)定性好,BCA試劑的蛋白質(zhì)測定范圍是20-2000μg/ml
3.經(jīng)濟(jì)實(shí)用,除 試管外,測定可在微板孔中就進(jìn)行,大大節(jié)約樣品和試劑用量;
4.抗試劑干擾能力比較強(qiáng),如去垢劑,尿素等均無影響
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