流式細胞術是一種基于檢測設備-流式細胞儀，對懸浮的單個活細胞或顆粒進行快速、多參數檢測分析的一項生物學前沿技術。自20世紀60年代后期發(fā)展起來后，已在生物醫(yī)學領域得到了廣泛的應用，免疫相關的科研實驗室流式檢測已成為研究手段，而臨床的流式則成為了自基因診斷技術以來又一嶄新的高技術檢測方法。

那么為了得到一個真實可靠、準確靈敏的實驗結果，都有哪些必然的要素呢？我們把這些影響的因素歸納為流式細胞術實驗的三大要素，分別為：流式試劑的搭配、檢測樣本的制備、流式儀器的應用。今天帶大家來認識下這三位流式界的好朋友

熒光標記抗體的搭配

在流式細胞術的免疫分型檢測中，有各種熒光素偶聯的抗體需要進行選擇，特別是對于多色實驗來說，對熒光素的選擇搭配有著很高的要求，搭配效果直接影響到檢測效果，那么我們根據什么來進行選擇呢？

首要硬性條件-流式細胞儀的配置，流式細胞儀的激光器和濾光片配置決定了我們可以選擇的偶聯熒光標記的種類與數目。

目標蛋白條件-染料的亮度與抗原表達量相適應，目標蛋白的表達水平或豐度決定了熒光素的搭配。低表達的抗原，推薦搭配高亮度熒光素；高表達的抗原，推薦搭配低亮度熒光素。

熒光素條件-熒光素之間的光譜重疊最小化，我們需要盡量選擇光譜重疊小的熒光素組合，光譜重疊嚴重的熒光素同時檢測會導致熒光溢漏，干擾檢測結果，需調節(jié)補償后才能進行準確分析；還可優(yōu)先選擇不同激光激發(fā)的熒光素組合，如FITC搭配APC、PE搭配APC。