抗體是免疫蛋白質(zhì)，在宿主對病毒、細菌和真菌等感染性病原體的防御中發(fā)揮著基本作用。這些Y型蛋白質(zhì)的免疫功能是由其結(jié)合抗原的能力決定的，抗原是由細胞釋放的或在細胞上發(fā)現(xiàn)的刺激免疫反應(yīng)的分子。

除了在宿主免疫中的作用，抗體在研究和治療方面也被證明是有價值的。兩種類型的抗體，多克隆抗體和單克隆抗體為研究人員提供了檢測或量化目標(biāo)抗原的不同方法，主要是由于特異性和親和力的不同。在這篇文章中，我們將更詳細地描述多克隆抗體和單克隆抗體，并考慮每種類型如何用于各種應(yīng)用。

什么是多克隆抗體？

如何產(chǎn)生用于研究的多克隆抗體？

為了產(chǎn)生適合研究目的的多克隆抗體，首先必須給實驗室動物注射刺激免疫反應(yīng)的肽、蛋白質(zhì)、分子或整個細胞。

一旦宿主的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生了針對注射抗原的抗體，就必須從動物的抗血清中收集和純化這些抗體。從動物血清中純化多克隆抗體的一種方法是通過免疫后應(yīng)用抗原包被磁珠、沉淀或色譜法

在這種基于親和力的純化方法減少了最終多克隆群體中的非特異性抗體后，這些抗體就可以用于基于檢測的方法，如西方印跡法、免疫組化法和酶聯(lián)免疫吸附法。

什么是單克隆抗體？

如何產(chǎn)生用于研究的單克隆抗體？

雜交瘤的產(chǎn)生包括將免疫小鼠的分離脾臟細胞與永生化骨髓瘤細胞融合。然后根據(jù)目標(biāo)抗原的特異性和反應(yīng)性對產(chǎn)生的雜交瘤的克隆進行篩選和選擇。由于單克隆抗體對單一表位具有高度的特異性，它們可以證明對研究科學(xué)家和臨床醫(yī)生都是有用的。

單克隆抗體和多克隆抗體之間的區(qū)別

單克隆抗體和多克隆抗體的優(yōu)缺點

單克隆抗體的優(yōu)點 

1.不朽的供應(yīng)：一旦創(chuàng)建了單克隆抗體雜交瘤，就可以產(chǎn)生大量的高度特異性抗體。

2.高度特異：mAb在測定中用作一級抗體或用于檢測組織中的抗原是非常理想的選擇。

3.重現(xiàn)性高：單克隆抗體產(chǎn)生較低背景染色和批次變化，并且具有低交叉反應(yīng)性。因此，它們提供可重復(fù)的結(jié)果并確保親和純化的效率。

單克隆抗體的缺點 

1.特異性過高，以致于無法進行跨物種的檢測。

2.與多克隆抗體相比，更易受化學(xué)處理造成的抗原表位丟失的影響。

多克隆抗體的優(yōu)點 

1.高親和力：由于抗體的結(jié)合點多于一個表位，多克隆抗體可以幫助擴增具有低表達水平的靶蛋白的信號。這使得這些抗體成為免疫沉淀和染色質(zhì)免疫沉淀的理想選擇。

2.容忍輕微的變化：多克隆相對單克隆抗體來說，對于抗原變化（輕度變性，多態(tài)性，糖基化的異質(zhì)性）較不敏感。

3.更強的檢測信號：多個表位通常提供更強大的信號，更加容易檢測。

多克隆抗體的缺點

1.易產(chǎn)生批次間差異。

2.產(chǎn)生大量非特異性抗體，可能會在某些應(yīng)用中產(chǎn)生背景信號。

3.由于具有多個表位，檢測免疫原序列的交叉反應(yīng)性非常重要。

4.不適用于探測抗原的特定結(jié)構(gòu)域，因為抗血清通常會識別多個結(jié)構(gòu)域。