BUNSEN本生：酶標板如何處理，增加抗體結(jié)合能力?

　　根據(jù)酶標板與蛋白和其它分子結(jié)合能力的不同可以將酶標板分為以下幾類：

　　1 高結(jié)合力酶標板：

　　酶標板經(jīng)表面處理后蛋白結(jié)合能力大大增強，可達300~400ng IgG/cm2，主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標板可提高敏感性，并可相對減少包被蛋白的濃度和用量，不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應?？乖蚩贵w包被后，以非離子去污劑無法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位，需使用蛋白作為封閉劑。

　　2、中結(jié)合力酶標板：

　　酶標板經(jīng)表面疏水鍵被動與蛋白結(jié)合，適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體，其蛋白結(jié)合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性，適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體，可降低潛在的非特異性交叉反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

　　3、氨基化酶標板：

　　酶標板經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基，其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值，其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結(jié)合的能力，可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性，一部分蛋白分子無法結(jié)合;此外，其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性，使用的封閉液必須能夠與非反應性氨基基團和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團發(fā)生作用。

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