Waters氨基酸標準品試劑盒的維護和使用

I. 簡介

  制藥及食品和飼料行業(yè)中的許多應(yīng)用都需要進行氨基酸分析。沃特世提供多款游離氨基酸標準品，用于氨基酸的定性和定量測定、方法開發(fā)以及AccQ•Tag™ Ultra或AccQ•Tag方法的故障排查。本維護和使用手冊詳細說明了上述標準品的使用方法。

  本產(chǎn)品僅供研究使用，無法用于診斷。

II. 復(fù)溶指南

配合紫外或熒光檢測儀器常規(guī)使用時，復(fù)溶方法如下：

細胞培養(yǎng)標準品試劑盒（P/N：186009300）

1. 取1.2 mL 0.1 M HCl，加入17種水解氨基酸標準品（藍色樣品瓶）中，每種氨基酸的濃度均為1000μM（胱氨酸除外，其濃度為500μM）。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標準品可穩(wěn)定存放60天。

2. 取250μL 0.1 M HCl，加入細胞培養(yǎng)補充氨基酸標準品（白色樣品瓶）中，每種氨基酸濃度均為1000μM。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標準品可穩(wěn)定存放60天（谷氨酰胺僅可存放15天）。

3. 將250μL制備好的水解氨基酸標準品加入細胞培養(yǎng)補充氨基酸標準品樣品瓶中，得到500μL濃度為500μM的氨基酸標準品溶液（胱氨酸除外，其濃度為250μM）。該溶液作為標準品儲備液，以建立標準曲線。冷凍保存，該標準品可穩(wěn)定存放60天（谷氨酰胺僅可存放15天）。

  注：如果發(fā)現(xiàn)隔墊上有固態(tài)標準品，請在旋渦混合時翻轉(zhuǎn)樣品瓶，確保所有粉末均溶解。

食品和飼料標準品試劑盒（P/N：186009299）

1. 取1.2 mL 0.1 M HCl，加入17種水解氨基酸標準品（藍色樣品瓶 ）中，每種氨基酸的濃度均為1000μM（胱氨酸除外，其濃度為500μM）。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標準品可穩(wěn)定存放60天。

2. 取250μL 0.1 M HCl，加入食品和飼料補充氨基酸標準品（綠色樣品瓶 ）中，濃度均為1000μM。渦旋混合10 s。復(fù)溶后冷凍保存，標準品可穩(wěn)定存放60天。

3. 將250μL制備好的水解氨基酸標準品加入食品和飼料補充氨基酸標準品樣品瓶中，得到500μL濃度為500μM的氨基酸溶液（胱氨酸除外，其濃度為250μM）。該溶液作為標準品儲備液，以建立標準曲線。如果復(fù)溶后冷凍保存，標準品可穩(wěn)定存放60天。

  注：如果發(fā)現(xiàn)隔墊上有固態(tài)標準品，請在旋渦混合時翻轉(zhuǎn)樣品瓶，確保所有粉末均已溶解。

校準標準品制備示例

采用如下稀釋方案創(chuàng)建校準標準品系列。這將作為創(chuàng)建標準曲線的初始校準標準品儲備液。

1. 校準標準品7：500μM（胱氨酸250μM）- 50μg/mL（胱氨酸25μg/mL）

  首先將試劑盒內(nèi)的大樣品瓶和小樣品瓶復(fù)溶并合并，然后從裝有500 μL 500 μM 26種氨基酸（細胞培養(yǎng)標準品）或21種氨基酸（食品和飼料標準品）的樣品瓶開始操作。

2. 校準標準品6：250 μM（胱氨酸125 μM）- 25 μg/mL（胱氨酸12.5 μg/mL）

  取215 μL校準標準品7，加入校準標準品6樣品瓶中。加入215 μL 0.1 M HCl。混合。

3. 校準標準品5：100 μM（胱氨酸50 μM）- 10 μg/mL（胱氨酸5 μg/mL）

  取150 μL校準標準品6，加入校準標準品5樣品瓶中。加入225 μL 0.1 M HCl?；旌稀?/span>

4. 校準標準品4：20 μM（胱氨酸10 μM）- 2 μg/mL（胱氨酸1 μg/mL）

  取93 μL校準標準品5，加入校準標準品4樣品瓶中。加入372 μL 0.1 M HCl?；旌?。

5. 校準標準品3：10 μM（胱氨酸5 μM）- 1 μg/mL（胱氨酸0.5 μg/mL）

  取182 μL校準標準品4，加入校準標準品3樣品瓶中。加入182 μL 0.1 M HCl?；旌?。

6. 校準標準品2：2.5 μM（胱氨酸1.25 μM）- 0.25 μg/mL（胱氨酸0.125 μg/mL）

  取84 μL校準標準品3，加入校準標準品2樣品瓶中。加入252 μL 0.1 M HCl。混合。

7. 校準標準品1：0.5 μM（胱氨酸0.25 μM）- 0.05 μg/mL（胱氨酸0.025 μg/mL）

  取56 μL校準標準品2，加入校準標準品1樣品瓶中。加入224 μL 0.1 M HCl?；旌稀?/span>

正纈氨酸內(nèi)標（P/N：186009301）

  取6 mL稀釋劑，加入內(nèi)標（紅色樣品瓶）中，渦旋 混合10 s，濃度為250μM。

III. 儲存

  收貨后請核對試劑盒清單。如果包裝被打開、損壞，內(nèi)容物缺失或超出有效期，請勿使用本產(chǎn)品（如果適用）。如需訂購替換試劑盒或部件，請聯(lián)系當?shù)氐匿N售代表。訂購時請?zhí)峁┧璁a(chǎn)品的產(chǎn)品部件號和批號。

*復(fù)溶后，細胞培養(yǎng)試劑盒中的谷氨酰胺會隨時間推移降解。如果復(fù)溶后冷凍保存，產(chǎn)品標示的谷氨酰胺濃度在最長15天內(nèi)有效。