斐林試劑和班氏試劑的使用方法及原理不盡相同。斐林試劑和班氏試劑都是檢驗(yàn)還原性糖的試劑,二者的使用方法及原理、成分也有區(qū)別,下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡單總結(jié)。
?。?)班氏試劑常用于尿糖的鑒定,其配方與斐林試劑不一樣,其配方為:
①400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無水碳酸鈉;
?、?0mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅。制成溶液;
?、郯袰uSO4溶液倒入檸檬酸鈉溶液中,邊加邊攪,如產(chǎn)生沉淀可濾去。
?。?)其反應(yīng)原理與斐林試劑略有差別。利用斐林試劑鑒定時(shí),斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應(yīng)生成酒石酸絡(luò)銅離子。
酒石酸絡(luò)銅離子和可溶性還原糖在加熱條件下反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀。而班氏試劑中的產(chǎn)生卻是這樣的:檸檬酸鈉作為絡(luò)合劑,由碳酸鈉提供堿性。CuSO4與檸檬酸鈉溶液和Na2CO3溶液混合時(shí)生成檸檬酸絡(luò)銅離子,檸檬酸絡(luò)銅離子與葡萄糖中的醛基反應(yīng)生成磚紅色沉淀。
?。?)兩種試劑的保存方式不同。斐林試劑甲和斐林試劑乙混合后會(huì)因酒石酸有一定的還原性而自發(fā)地緩慢產(chǎn)生氧化亞銅沉淀,因此斐林試劑一般為現(xiàn)用現(xiàn)配;而班氏試劑的配方中,檸檬酸鈉比較穩(wěn)定,實(shí)際堿性也不強(qiáng),不易還原銅離子產(chǎn)生氧化亞銅沉淀,因此該試劑可長期保存。
當(dāng)然,無論用班氏試劑還是斐林試劑,歸根結(jié)底都是二價(jià)銅與醛基在沸水浴加熱條件下反應(yīng)而生成磚紅色的沉淀,兩者反應(yīng)現(xiàn)象一樣,這就是二者的相同之處。
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