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            應(yīng)用指南—puriFlash® 5.250 + iELSD 實(shí)現(xiàn)對(duì)活性藥物成分的高通量純化!

            來(lái)源:上海漢堯儀器設(shè)備有限公司   2023年11月08日 13:44  

            純化是藥物開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵步驟,從分析到放大再到工藝,純化和鑒定是將藥物推向市場(chǎng)的重要步驟。因此必須有一個(gè)高通量的解決方案,以提供足夠量的純化化合物。而 Advion Interchim Scientific 制備色譜系統(tǒng)可以輕松實(shí)現(xiàn)活性藥物成分(API)與其雜質(zhì)的分離,達(dá)到純化的目的。

             

            案例分享

            使用AIS puriFlash®5.250制備系統(tǒng),對(duì)非處方藥(OTC)中的五種活性成分進(jìn)行了純化,包括Caffeine、格拉法寧、酮芬、黃酮和非諾貝特(圖1),同時(shí)使用expression® CMS小型臺(tái)式質(zhì)譜儀同步確認(rèn)化合物ID。

            img1 

            1.CaffeineCaffeine是一種具有興奮作用的天然化學(xué)物質(zhì),存在于咖啡、茶、可可等中。

            2.格拉芬寧:格拉芬寧是一種非體抗炎藥(NSAID),由于過(guò)敏反應(yīng)的高風(fēng)險(xiǎn),1991年撤出市場(chǎng)。

            3.芬:一種非體抗炎藥(NSAID),酮洛芬用于治療炎癥、腫脹、僵硬和關(guān)節(jié)疼痛。由于增加了心臟病發(fā)作、中風(fēng)、刺激和其他問(wèn)題的風(fēng)險(xiǎn),該藥于1995年停產(chǎn)。

            4.黃酮:植物中普遍存在的一種代謝物。

            5.非諾貝特:一種處方藥,用于降低和治療血液中的高膽固醇和甘油三酯(類脂物質(zhì))水平。


            實(shí)驗(yàn)過(guò)程

            LC分析條件

            流動(dòng)相AWater + 0.1% TFA

            流動(dòng)相BAcetonitrile

            色譜柱Aquity UPLC BEH C18 1.7μm, 50x2.1mm ID 

            流速1mL/min

            上樣方式液體上樣

            上樣量1μL

            檢測(cè)波長(zhǎng)UV254nm

            洗脫條件

            T(min)

            A(%)

            B(%)

            00:00

            95

            5

            01:40

            2

            98

             

             

             

            LC分離結(jié)果

            img2 

            制備條件

            系統(tǒng)puriFlash® 5.250+iELSD 

            流動(dòng)相AWater

            流動(dòng)相BAcetonitrile

            色譜柱US5C18HQ-150/300 

            流速32mL/min

            上樣方式液體上樣

            上樣量0.5mL

            粗樣50mg 

            洗脫條件

            T(min)

            A(%)

            B(%)

            00:00

            95

            5

            22:00

            0

            100

             

             

            實(shí)驗(yàn)結(jié)果

             

            下圖分別顯示UV Scan (綠色),ELSD (35°C) (藍(lán)色),TIC 160-500m/zXIC 371-374 m/z,XIC 220-224m/z (紫色)的數(shù)據(jù)圖,可以看到五種物質(zhì)得到了很好的分離,并在質(zhì)譜上進(jìn)行了確認(rèn)。

            img3 

            img4 

             

            結(jié)論

            1、    Advion Interchim Scientific expression®CMS 小型臺(tái)式質(zhì)譜儀對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行鑒定,可以快速、準(zhǔn)確地識(shí)別出感興趣的化合物。

            2、   Advion Interchim Scientific采用集成式iELSD與puriFlash® 5.250純化制備系統(tǒng)為一體,可實(shí)現(xiàn)無(wú)紫外吸收的樣品的檢測(cè)。

             

             


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