核酸作為一切分子生物學研究的基礎,而且提取的核酸質(zhì)量高低也是決定下游實驗成敗的關鍵因素之一。在開發(fā)核酸提取試劑時,除了常規(guī)的化學成分,一些小分子核酸或酶類可以很大程度提高提取效率或去除非目的物質(zhì)干擾,成為核酸提取中的重要組分。
核酸沉淀的輔助物質(zhì)
Carrier RNA概念及作用
Carrier RNA,中文名載體RNA,又叫核酸助沉劑。在核酸提取環(huán)節(jié),提取使用到的離心管壁多是聚丙烯的材料,管壁上有靜電,會吸附核酸。在提取純化過程中采用Carrier RNA 可幫助核酸去除靜電效應,保證核酸能很好被吸附到純化柱上,提高洗脫效率,從而達到盡可能多的回收樣本中核酸!
Carrier RNA常見類型
作為核酸沉淀的輔助物質(zhì),Carrier RNA有多種類型,PolyA鉀鹽、大腸桿菌總RNA、酵母總RNA、tRNA等;
Carrier RNA常見問題
Carrier RNA室溫放置一段時間還能用嗎?Carrier RNA出現(xiàn)降解影響使用嗎?Carrier RNA影響下游實驗嗎?
Carrier RNA是溶解在RNA保護劑中的,液體Carrier RNA在37℃或室溫下短期內(nèi)(7天內(nèi))放置影響不大;Carrier RNA本質(zhì)上是500 nt~1000 nt范圍內(nèi)的片段,稍微降解不影響正常使用;對于下游應用為熒光定量PCR,Carrier RNA對Ct值無影響,對于下游應用為NGS,可根據(jù)實際需求添加。
產(chǎn)品介紹
翌圣生物Carrier RNA是酵母來源的RNA,無DNase、RNase酶殘留,蛋白和DNA殘留含量極低??捎糜诓《竞怂崽崛 ⑽⒘緿NA提取等實驗,提取的核酸可用于后續(xù)RT-PCR,RT-qPCR等實驗。產(chǎn)品分為液體和凍干型粉末制劑,便于直接使用和長距離運輸、保存。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 保存條件和效期 |
Carrier RNA, 6 μg/μL | 19701ES | 1 mL / 5 mL / 100 mL | -25~-15℃保存,有效期2年 |
Carrier RNA Powder, 216 μg/tube | 19703ES | 1 tube / 100 tube / 1000 tube | 室溫保存,有效期2年 |
Carrier RNA Powder, 310 μg/tube | 19704ES | 1 tube / 100 tube / 1000 tube | 室溫保存,有效期2年 |
線性化丙烯酰胺溶液
線性化丙烯酰胺溶液的概念和作用
線性丙烯酰胺,英文名稱Linear Acrylamide(Linear Polyacrylamide,簡稱LPA),是一種共沉淀劑,有助于核酸純化過程中核酸的沉淀。
線性化丙烯酰胺溶液的特點
是一種中性載體,且非生物性來源,因此,不含潛在的核酸或核酸酶污染;
不會干擾A260/A280讀數(shù)、且不會抑制聚合酶以及限制性內(nèi)切酶活性;
兼容于其他后續(xù)分子生物學應用,如PCR,酶切消化等;
助沉皮克級別以上的 DNA 和 RNA (包括 Oligo)可回收片段長度在 20nt 以上,單鏈雙鏈核酸均可。
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 保存條件和效期 |
Linear Acrylamide Solution(5 mg/mL) | 19701ES | 1 mL | 4℃保存,有效期3年。 |
核酸提取輔助酶
RNase A
RNase A的概念和作用
核糖核酸酶A(Ribonuclease A,RNase A),作為一種核糖核酸內(nèi)切酶(endoribonuclease),特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)殘基。核糖核酸酶A(RNase A)最常見的應用在于質(zhì)粒DNA或基因組DNA制備過程中去除RNA,另外,本品還可用于RNA酶保護分析、RNA序列分析等分子生物學實驗。
RNase A的特點
RNase A來源于Bovine pancreas,無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶污染,無需預先加熱,可直接使用,耐高溫環(huán)境。
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 保存條件和效期 |
RNase A(100 mg/mL) | 10406ES | 1 mL | 產(chǎn)品-20℃保存,有效期2年。 |
RNase A(10 mg/mL) | 10405ES | 1mL | -20℃保存,有效期1年 |
Ribonuclease A(RNase A),from bovine pancreas | 10407ES | 100mg/1g | -20℃干燥保存,有效期2年 |
Deoxyribonuclease I (DNase I)
DNase I的概念和作用
脫氧核糖核酸酶I(DNase I),即Deoxyribonuclease I,一種發(fā)現(xiàn)于多種細胞和組織的核酸內(nèi)切酶,靶向切割鄰近嘧啶的磷酸二酯鍵,產(chǎn)生5’端為磷酸基團、3’端為羥基的多聚核苷酸,平均消化產(chǎn)物最小為多聚四核苷酸。DNase可催化多種形式DNA,如單鏈DNA、雙鏈DNA,甚至染色質(zhì)(其切割速率受組蛋白影響)。分子生物學實驗中常用于清除蛋白中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使標記堿基插入DNA。
DNase I的特點
DNase I的最佳的工作范圍是pH7-8,且活性依賴于Ca2+,并可被二價金屬離子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保護酶使其不被水解。在Mg2+存在下,該酶可隨機識別和切斷DNA任一條鏈上的任意位點;而在Mn2+存在的條件下,可同時識別DNA的兩條鏈并在幾乎相同的位點進行切割。
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 保存條件和效期 |
Deoxyribonuclease I(DNase I) from bovine pancreas | 10607ES | 15 KU/10×15KU | -20℃保存,有效期2年 |
Deoxyribonuclease I(DNase I) from bovine pancreas | 10608ES | 25 mg/100mg/1g | -20℃保存,有效期2年 |
蛋白酶K
蛋白酶K的概念和作用
Proteinase K(蛋白酶 K)是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶,其相對分子量約為 29.3 kDa,可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。Proteinase K 應用廣泛,可用于制備脈沖電泳的染色體 DNA,蛋白質(zhì)印跡以及去除 DNA 和 RNA制備中的核酸酶等實驗,而變性劑如 SDS(1 %)可提高其活性。
蛋白酶K的特點
源于基因重組酵母菌株;
不含 RNase 和 DNase;
在尿素和 SDS 中活性穩(wěn)定存在;
在較廣的 pH 范圍內(nèi)(pH 4.0 – 12.0)均有活性,最佳 pH 范圍為 pH 7.5 - 9.0;
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 保存條件和效期 |
Proteinase K蛋白酶K | 10401ES | 100mg/1g/5 g/100g | 4℃保存,有效期 3 年。 |
Proteinase K Solution蛋白酶K溶液(20 mg/mL) | 10412ES | 1mL/10mL/25mL/500mL | 4℃保存,有效期2年。 |
RNA穩(wěn)定劑
動植物組織RNA穩(wěn)定液
動植物組織RNA穩(wěn)定液的作用
RNA酶廣泛存在環(huán)境中,很容易降解新鮮采取的動植物組織、血液、體液等樣本中的RNA。RNAsafe動植物組織穩(wěn)定液(RNAsafe Tissue Stabilizer)是專門開發(fā)用于穩(wěn)定并保護采集樣本內(nèi)RNA,作為一種無毒溶液,可迅速滲入組織,滅活內(nèi)源RNase。
動植物組織RNA穩(wěn)定液的特點
操作極其簡便:只需要將新鮮組織切成合適大?。ā?.5 cm)的組織塊,浸入5~10倍體積的RNAsafe中即可。
穩(wěn)定周期長:經(jīng)RNAsafe浸潤的組織/細胞可在37℃保存1天,室溫保存1周,4℃保存4周,-20℃/-80℃長期保存。
下游兼容性廣:幾乎兼容于所有的RNA分離方法,如HieffTM Total RNA Extraction Reagent(貨號:10606ES60),以及幾乎所有的商業(yè)化RNA抽提試劑盒,包括離心柱抽提法,磁珠純化法等。
材料應用性廣:可用于多種動植物組織(如腦、心臟、肝臟、胰臟、腎臟、脾臟、睪丸、肌肉、植物的莖葉等)的保存,還可用于酵母、組織培養(yǎng)細胞等。
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 保存條件和效期 |
RNAsafe Tissue Stabilizer RNAsafe | 10604ES60 | 100 mL | 室溫保存,有效期5年。 |
相關產(chǎn)品推薦
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 保存條件和效期 |
Lysozyme溶菌酶 | 10402ES | 5/50 g | -20℃保存,有效期3年 |
Lyticase (10?U/μL) 溶壁酶 | 10403ES | 1500/3000/10000 U | -20℃保存 |
Snailase 蝸牛酶 | 10404ES | 5/10 g | 2-8℃保存,有效期2年 |
RNAsafe-ICE冰凍動植物組織RNA穩(wěn)定-過渡溶液 | 10605ES | 100 mL | 室溫保存,有效期2年 |
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