DMEM培養(yǎng)基是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)基,常用于培養(yǎng)多種哺乳動物細(xì)胞。那么你知道DMEM培養(yǎng)基的配制方法是什么嗎?讓我們一起來看看吧!
一、準(zhǔn)備所需材料:
1.DMEM粉末
2.蒸餾水
3.生長因子(如胰島素、胰島素樣生長因子、轉(zhuǎn)鐵蛋白等)
4.氨基酸(如谷氨酸、絲氨酸、甘氨酸等)
5.維生素(如維生素C、維生素E等)
6.礦物質(zhì)鹽溶液(如鈣鹽、鉀鹽、鎂鹽等)
7.脂質(zhì)(如膽固醇、油酸等)
8.血清(可選)
二、使用蒸餾水將DMEM粉末溶解
1.根據(jù)需要制備的培養(yǎng)基量,按比例計算DMEM粉末的用量。
2.將所需量的DMEM粉末加入干凈的燒杯中。
3.加入足夠的蒸餾水?dāng)嚢枞芙?,直?/span>DMEM粉末wan全溶解。
三、添加生長因子、氨基酸和維生素
1.根據(jù)需要培養(yǎng)的細(xì)胞類型和實驗要求,添加適量的生長因子、氨基酸和維生素。
2.按照zhi定的濃度將它們加入DMEM溶液中,并充分?jǐn)嚢杌旌稀?/span>
四、添加礦物質(zhì)鹽溶液和脂質(zhì)
1.根據(jù)需要培養(yǎng)的細(xì)胞類型和實驗要求,添加適量的礦物質(zhì)鹽溶液和脂質(zhì)。
2.按照zhi定的濃度將它們加入DMEM溶液中,并充分?jǐn)嚢杌旌稀?/span>
五、調(diào)整pH值
1.使用pH計測量DMEM溶液的pH值。
2.如有需要,使用鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)整pH值至7.2-7.4。
六、配制完畢:
1.將配制好的DMEM培養(yǎng)基分裝到無菌培養(yǎng)瓶或板中。
2.如需長期保存,可以在-20℃或更低溫度下保存。
3. DMEM培養(yǎng)基的配制方法可能會因?qū)嶒炓蠛图?xì)胞類型的不同而有所變化,所以在具體使用前最好參考相關(guān)文獻(xiàn)或生產(chǎn)廠家的說明書。
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