培養(yǎng)基是指由人工方法配制而成,供微生物培養(yǎng)、分離、鑒別、研究和保存用的混合營養(yǎng)物制品,英文為 culture medium 或 medium。微生物的生長繁殖,需要一定的營養(yǎng)物質(zhì)和適宜的環(huán)境條件。
一、下面具體介紹培養(yǎng)基種類:
1、按組成成分分類 :
純化學(xué)培養(yǎng)基:僅含有已知分子結(jié)構(gòu)和純度的化學(xué)成分的培養(yǎng)基。
未定義和部分定義的化學(xué)培養(yǎng)基 :全部或部分由天然物質(zhì),加工過的物質(zhì)或其他不純的化學(xué)物質(zhì)構(gòu)成的培養(yǎng)基。
2、按狀態(tài)分類:
液體培養(yǎng)基:一種或多種成分組成的水溶液(如:蛋白胨水,營養(yǎng)肉湯)。
固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基:含有不同濃度固化物(如瓊脂、明膠)的液體培養(yǎng)基。
3、按用途分類:
運(yùn)輸培養(yǎng)基:在取樣后和實(shí)驗(yàn)室處理前保護(hù)和維持微生物活性且不允許明顯增殖的培養(yǎng)基。
懸浮培養(yǎng)基:將測試樣本的微生物分散到液相中,在整個(gè)接觸過程中不產(chǎn)生增殖或抑制作用的培養(yǎng)基。
復(fù)蘇培養(yǎng)基:能夠使受損或應(yīng)激的微生物修復(fù),使微生物恢復(fù)正常生長能力,但不一定促進(jìn)微生物繁殖的培養(yǎng)基。
保藏培養(yǎng)基:用于在一定期限內(nèi)保護(hù)和維持微生物活力,防止長期保存對其的不利影響,或使其在長期保存后容易復(fù)蘇的培養(yǎng)基。
增菌培養(yǎng)基:通常為液體培養(yǎng)基,能夠給微生物的繁殖提供特定的生長環(huán)境。
選擇性增菌培養(yǎng)基:能夠允許特定的微生物在其中繁殖,而部分或全部抑制其他微生物生長的培養(yǎng)基。
非選擇性增菌培養(yǎng)基:能夠保證多種微生物生長的培養(yǎng)基。
分離培養(yǎng)基:支持微生物生長的固體或半固體培養(yǎng)基。
選擇性分離培養(yǎng)基:支持特定微生物生長而抑制其他微生物生長的分離培養(yǎng)基。
非選擇性分離培養(yǎng)基:對微生物沒有選擇性抑制的分離培養(yǎng)基。
計(jì)數(shù)培養(yǎng)基:能夠?qū)ξ⑸锒康倪x擇性或非選擇性培養(yǎng)基。
確證培養(yǎng)基:在初步復(fù)蘇、分離和(或)增菌階段后對微生物進(jìn)行部分或全鑒定或鑒別的培養(yǎng)基。
鑒別培養(yǎng)基(特異性培養(yǎng)基):能夠進(jìn)行一項(xiàng)或多項(xiàng)微生物生理和/或生化特性鑒定的培養(yǎng)基。
鑒定培養(yǎng)基:能夠產(chǎn)生一個(gè)特定的鑒定反應(yīng)而通常不需要進(jìn)一步確證實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)基 。
4、按制備方法分類 :
商品化即用型培養(yǎng)基:以即用形式或融化后即用形式置于容器內(nèi)供應(yīng)的液體、固體或半固體培養(yǎng)基。
商品化脫水合成培養(yǎng)基:使用前需加水和進(jìn)行處理的干燥培養(yǎng)基。
二、培養(yǎng)基選擇參考建議:
1、建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞選的培養(yǎng)基。可以查閱參考文獻(xiàn),也可以在一些生物公司的網(wǎng)站上搜索,如Invitrogen網(wǎng)站上有一個(gè)Cell Line Database的工具,選擇你感興趣的細(xì)胞類型,它就會(huì)彈出推薦的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,有時(shí)還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟,很方便。
2、其它實(shí)驗(yàn)室慣用的培養(yǎng)基不妨一試,許多培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞。
3、根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細(xì)胞株多選RPMI1640 。
4、 用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細(xì)胞,觀察其生長狀態(tài),可以用生長曲線、集落形成率等指標(biāo)判斷,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇最佳培養(yǎng)基,這是最客觀的方法,但比較繁瑣。
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