重組胰蛋白酶攜手羧肽酶B、雙堿性內(nèi)切酶助力重組胰島素生產(chǎn)
生物酶是在生物體內(nèi)發(fā)揮催化作用的生物分子,能促使生化反應(yīng)更迅速進(jìn)行,而自身不被消耗或改變。因其?效專?、反應(yīng)條件溫和、對(duì)環(huán)境友好等優(yōu)勢(shì),在生物醫(yī)藥、體外診斷、合成生物、綠色生物催化、醫(yī)美、食品、能源等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。
隨著人們對(duì)生物酶應(yīng)用研究的深入和拓展,對(duì)酶的種類(lèi)和性能提出了更高的要求。然而,自然界或市售的生物酶有時(shí)難以滿足研究需求,酶應(yīng)用研究領(lǐng)域面臨著“無(wú)酶可用”、酶性能“不足”等問(wèn)題亟待解決。
小翌為大家準(zhǔn)備好了性價(jià)比的幾款無(wú)動(dòng)物源性蛋白酶,為胰島素生產(chǎn)等生物制藥領(lǐng)域提供助力:
重組胰蛋白酶
胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶,可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組胰蛋白酶多用大腸桿菌或酵母系統(tǒng)重組表達(dá)并經(jīng)過(guò)多步層析純化獲得,無(wú)糜蛋白酶等雜酶污染。重組胰蛋白酶與天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性,其氨基酸序列與豬源胰蛋白酶序列同源。因其無(wú)動(dòng)物源污染性和純度高,在醫(yī)藥開(kāi)發(fā)、生化研究、蛋白組學(xué)等領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。
翌圣目前可提供2款重組胰蛋白酶,分別為藥典級(jí)(Cat#40512ES)、質(zhì)譜級(jí)(Cat#20416ES)
藥典級(jí):大腸桿菌表達(dá)的重組胰蛋白酶,氨基酸序列與豬胰腺來(lái)源的胰蛋白酶一致,生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料,無(wú)外源性的病毒污染,可替代豬胰腺來(lái)源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過(guò)程中,如:細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞發(fā)酵、蛋白質(zhì)的酶解或各種組織的細(xì)胞分離等。本產(chǎn)品純度高、不含雜酶、宿主蛋白和 DNA 殘留量符合藥典標(biāo)準(zhǔn),避免了雜質(zhì)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,最適pH為7.0-9.0,pH為2±0.5。
質(zhì)譜級(jí):畢赤酵母表達(dá)的重組豬胰蛋白酶,在GMP法規(guī)下生產(chǎn),不含任何動(dòng)物源成分,無(wú)動(dòng)物源性的病毒污染,天然缺乏糜蛋白酶活性,并已過(guò)濾除菌。胰蛋白酶活性以國(guó)際通用活性(USP)為準(zhǔn),優(yōu)于進(jìn)口同類(lèi)產(chǎn)品,其中β-Trypsin的HPLC含量可達(dá)80%以上,儲(chǔ)存穩(wěn)定性高,蛋白質(zhì)組學(xué)酶解漏切率比進(jìn)口產(chǎn)品低50%??商娲鹊鞍酌甘褂?,且有很多優(yōu)勢(shì),如無(wú)雜酶活性,高穩(wěn)定性,高活性;胰蛋白酶容易自切產(chǎn)生自身自切片段影響質(zhì)譜分析結(jié)果,而重組胰蛋白酶(質(zhì)譜級(jí))通過(guò)甲基化修飾和突變保證其不自切,尤其適用于蛋白組學(xué)領(lǐng)域,如蛋白質(zhì)質(zhì)譜、測(cè)序、肽圖譜分析。
羧肽酶B又稱肽酰-L-賴氨酸(L-賴氨酸)水解酶、精蛋白酶,專一水解蛋白質(zhì)C-末端堿性氨基酸(賴氨酸、精氨酸、組氨酸)的氨基端;分子量為33.8 kD,等電點(diǎn)為6.0,最適pH為7.5-9.0。羧肽酶B的活性受精氨酸、賴氨酸的競(jìng)爭(zhēng)性抑制,金屬離子螯合劑如EDTA等抑制酶活。
翌圣重組羧肽酶B采用大腸桿菌表達(dá),在GMP法規(guī)下生產(chǎn),不含任何動(dòng)物源成分,無(wú)動(dòng)物源性的病毒污染,氨基酸序列與大鼠胰腺羧肽酶B一致,具有與動(dòng)物源性羧肽酶B相同的酶學(xué)性質(zhì),可替代動(dòng)物源性羧肽酶 B用于各種生物技術(shù)過(guò)程中, 如重組胰島素及其類(lèi)似物的生產(chǎn)、蛋白質(zhì)C-末端氨基酸的測(cè)定、蛋白質(zhì)C-末端組氨酸標(biāo)簽的去除、其他重組多肽類(lèi)物質(zhì)的生產(chǎn)、某些特殊化合物的酶促合成。
雙堿性內(nèi)切酶又稱為Kex2蛋白酶、YSCF蛋白酶,在酵母體內(nèi)Kex2蛋白酶負(fù)責(zé)加工killer toxin和α-factor的前體,是一種鈣離子依賴型的絲氨酸蛋白酶,能特異性識(shí)別和切割A(yù)rg-Arg、Lys-Arg等雙堿性氨基酸羧基端肽鍵。與胰蛋白酶(識(shí)別一個(gè)氨基酸殘基,對(duì)于目的蛋白序列的限制性較強(qiáng),且可能產(chǎn)生錯(cuò)切等問(wèn)題)不同,Kex2不能識(shí)別和切割單一堿性氨基酸即精氨酸或賴氨酸的羧基端肽鍵,所以Kex2這類(lèi)識(shí)別數(shù)個(gè)氨基酸殘基、特異性較高的酶的生產(chǎn)制備對(duì)酶切的正確性尤為重要。并且Kex2蛋白酶活性不受常規(guī)的絲氨酸蛋白酶抑制劑如抑肽酶、PMSF、TPCK所抑制。
翌圣重組Kex2蛋白酶是由畢赤酵母表達(dá),在GMP法規(guī)下生產(chǎn),不含任何動(dòng)物源成分,無(wú)動(dòng)物源性的病毒污染,與天然的釀酒酵母Kex2酶具有相同的酶特異性。最適作用pH為pH9.0,穩(wěn)定儲(chǔ)存的pH為5.0-6.0。生物制藥領(lǐng)域常用Kex2蛋白酶聯(lián)合羧肽酶B用于重組胰島素及其類(lèi)似物、GLP-1、重組多肽的生產(chǎn)制備,還可用于蛋白質(zhì)的酶解和肽圖分析、測(cè)序及融合標(biāo)簽的切割等。
選購(gòu)指南
貨號(hào) | 40512ES | 20416ES | 20417ES | 20418ES |
產(chǎn)品名稱 | 重組胰蛋白酶 (粉末)
| 重組胰蛋白酶 (質(zhì)譜級(jí))
| 重組羧肽酶B | 重組雙堿性內(nèi)切酶 |
來(lái)源 | 大腸桿菌 | 畢赤酵母 | 大腸桿菌 | 畢赤酵母 |
性狀 | 白色或類(lèi)白色結(jié)晶性粉末 | 無(wú)色至淡黃色,澄清液體 | 白色、類(lèi)白色、類(lèi)黃色粉末 | 白色、類(lèi)白色粉末 |
純度 | β-trypsin≥70% α-trypsin≤20% | β-trypsin>80% α-trypsin<20%
| 單一主條帶 | 單一主條帶 |
比活性 | ≥3800 USP units/mg 蛋白 | >6800 USP Unit/mg 蛋白
| ≥170 USP units/mg 蛋白 | ≥10.0 units/mg 蛋白 |
切割位點(diǎn) | 特異切割賴氨酸或者精氨酸殘基中的羧基端肽鍵 | 特異切割賴氨酸或者精氨酸殘基中的羧基端肽鍵 | 專一水解蛋白質(zhì)C-末端堿性氨基酸(賴氨酸、精氨酸)的氨基端 | 特異性識(shí)別和切割A(yù)rg-Arg、Lys-Arg等雙堿性氨基酸羧基端肽鍵 |
應(yīng)用 | 可替代豬胰腺來(lái)源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過(guò)程中,如:細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞發(fā)酵、蛋白質(zhì)的酶解或各種組織的細(xì)胞分離等。 重組蛋白方面: 1. 重組胰島素生產(chǎn);
| 可替代重組胰蛋白酶使用,且純度更高、活性更好。其不自切的特性,尤其適用于蛋白質(zhì)分析,如蛋白質(zhì)質(zhì)譜、測(cè)序、肽圖譜分析。 | 1. 重組胰島素及其類(lèi)似物的生產(chǎn)。 2. 蛋白質(zhì)C-末端氨基酸的測(cè)定。 3. 蛋白質(zhì)C-末端組氨酸標(biāo)簽的去除。 4. 其他重組多肽類(lèi)物質(zhì)的生產(chǎn)。 5. 某些特殊化合物的酶促合成
| 1. 重組胰島素及其類(lèi)似物的前體加工 2. 多肽藥物生產(chǎn)中的的工藝酶切 3. 生物研究:蛋白質(zhì)的酶解和肽圖分析、測(cè)序等。 4. 可用于融合標(biāo)簽的切割 |
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
質(zhì)量高:純度高,比活高,宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求;
無(wú)動(dòng)物源性:重組生產(chǎn),生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料,無(wú)外源性病毒污染;
GMP生產(chǎn):可提供GMP級(jí)別產(chǎn)品;
供應(yīng)穩(wěn)定:批量生產(chǎn),可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn);產(chǎn)品批次間無(wú)差異,質(zhì)量穩(wěn)定;
多形式供貨:可供應(yīng)液體和凍干粉2種形式,液體裝方便使用,凍干粉方便運(yùn)輸和儲(chǔ)存。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 目錄價(jià)/元 |
PerfCell™ Recombinant Trypsin(powder) 重組胰蛋白酶(粉末) | 40512ES10/60/80 | 10 mg/100 mg /1 g | 328/2298/16188 |
Recombinant Trypsin(MS-SAFE) 重組胰蛋白酶(質(zhì)譜級(jí)) | 20416ES60 | 100 µg | 595 |
Carboxypeptidase B, Recombinant, Expressed in E.coli 大腸桿菌表達(dá)重組羧肽酶B | 20417ES03/10 | 1 mg/10 mg | 735/2285 |
Paired-basic endopeptidase, Recombinant, Expressed in Yeast 酵母表達(dá)重組雙堿性內(nèi)切酶 | 20418ES60 | 100 µg | 1945 |
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。