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            重組胰蛋白酶攜手羧肽酶B、雙堿性內(nèi)切酶助力重組胰島素生產(chǎn)

            來(lái)源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2024年01月04日 17:50  

             


            生物酶是在生物體內(nèi)發(fā)揮催化作用的生物分子,能促使生化反應(yīng)更迅速進(jìn)行,而自身不被消耗或改變。因其?效專?、反應(yīng)條件溫和、對(duì)環(huán)境友好等優(yōu)勢(shì),在生物醫(yī)藥、體外診斷、合成生物、綠色生物催化、醫(yī)美、食品、能源等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。

             

            隨著人們對(duì)生物酶應(yīng)用研究的深入和拓展,對(duì)酶的種類(lèi)和性能提出了更高的要求。然而,自然界或市售的生物酶有時(shí)難以滿足研究需求,酶應(yīng)用研究領(lǐng)域面臨著“無(wú)酶可用”、酶性能“不足”等問(wèn)題亟待解決。

             

            小翌為大家準(zhǔn)備好了性價(jià)比的幾款無(wú)動(dòng)物源性蛋白酶,為胰島素生產(chǎn)等生物制藥領(lǐng)域提供助力:

             

            01

            重組胰蛋白酶

             

            胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶,可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組胰蛋白酶多用大腸桿菌或酵母系統(tǒng)重組表達(dá)并經(jīng)過(guò)多步層析純化獲得,無(wú)糜蛋白酶等雜酶污染。重組胰蛋白酶與天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性,其氨基酸序列與豬源胰蛋白酶序列同源。因其無(wú)動(dòng)物源污染性和純度高,在醫(yī)藥開(kāi)發(fā)、生化研究、蛋白組學(xué)等領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。

             

            翌圣目前可提供2款重組胰蛋白酶,分別為藥典級(jí)(Cat#40512ES)、質(zhì)譜級(jí)(Cat#20416ES)

             

            藥典級(jí):大腸桿菌表達(dá)的重組胰蛋白酶,氨基酸序列與豬胰腺來(lái)源的胰蛋白酶一致,生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料,無(wú)外源性的病毒污染,可替代豬胰腺來(lái)源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過(guò)程中,如:細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞發(fā)酵、蛋白質(zhì)的酶解或各種組織的細(xì)胞分離等。本產(chǎn)品純度高、不含雜酶、宿主蛋白和 DNA 殘留量符合藥典標(biāo)準(zhǔn),避免了雜質(zhì)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,最適pH為7.0-9.0,pH為2±0.5。

             

            質(zhì)譜級(jí):畢赤酵母表達(dá)的重組豬胰蛋白酶,在GMP法規(guī)下生產(chǎn),不含任何動(dòng)物源成分,無(wú)動(dòng)物源性的病毒污染,天然缺乏糜蛋白酶活性,并已過(guò)濾除菌。胰蛋白酶活性以國(guó)際通用活性(USP)為準(zhǔn),優(yōu)于進(jìn)口同類(lèi)產(chǎn)品,其中β-Trypsin的HPLC含量可達(dá)80%以上,儲(chǔ)存穩(wěn)定性高,蛋白質(zhì)組學(xué)酶解漏切率比進(jìn)口產(chǎn)品低50%??商娲鹊鞍酌甘褂?,且有很多優(yōu)勢(shì),如無(wú)雜酶活性,高穩(wěn)定性,高活性;胰蛋白酶容易自切產(chǎn)生自身自切片段影響質(zhì)譜分析結(jié)果,而重組胰蛋白酶(質(zhì)譜級(jí))通過(guò)甲基化修飾和突變保證其不自切,尤其適用于蛋白組學(xué)領(lǐng)域,如蛋白質(zhì)質(zhì)譜、測(cè)序、肽圖譜分析。

            02
            重組羧肽酶B
             

            羧肽酶B又稱肽酰-L-賴氨酸(L-賴氨酸)水解酶、精蛋白酶,專一水解蛋白質(zhì)C-末端堿性氨基酸(賴氨酸、精氨酸、組氨酸)的氨基端;分子量為33.8 kD,等電點(diǎn)為6.0,最適pH為7.5-9.0。羧肽酶B的活性受精氨酸、賴氨酸的競(jìng)爭(zhēng)性抑制,金屬離子螯合劑如EDTA等抑制酶活。

             

            翌圣重組羧肽酶B采用大腸桿菌表達(dá),在GMP法規(guī)下生產(chǎn),不含任何動(dòng)物源成分,無(wú)動(dòng)物源性的病毒污染,氨基酸序列與大鼠胰腺羧肽酶B一致,具有與動(dòng)物源性羧肽酶B相同的酶學(xué)性質(zhì),可替代動(dòng)物源性羧肽酶 B用于各種生物技術(shù)過(guò)程中, 如重組胰島素及其類(lèi)似物的生產(chǎn)、蛋白質(zhì)C-末端氨基酸的測(cè)定、蛋白質(zhì)C-末端組氨酸標(biāo)簽的去除、其他重組多肽類(lèi)物質(zhì)的生產(chǎn)、某些特殊化合物的酶促合成。

            03
            重組雙堿性內(nèi)切酶
             

            雙堿性內(nèi)切酶又稱為Kex2蛋白酶、YSCF蛋白酶,在酵母體內(nèi)Kex2蛋白酶負(fù)責(zé)加工killer toxin和α-factor的前體,是一種鈣離子依賴型的絲氨酸蛋白酶,能特異性識(shí)別和切割A(yù)rg-Arg、Lys-Arg等雙堿性氨基酸羧基端肽鍵。與胰蛋白酶(識(shí)別一個(gè)氨基酸殘基,對(duì)于目的蛋白序列的限制性較強(qiáng),且可能產(chǎn)生錯(cuò)切等問(wèn)題)不同,Kex2不能識(shí)別和切割單一堿性氨基酸即精氨酸或賴氨酸的羧基端肽鍵,所以Kex2這類(lèi)識(shí)別數(shù)個(gè)氨基酸殘基、特異性較高的酶的生產(chǎn)制備對(duì)酶切的正確性尤為重要。并且Kex2蛋白酶活性不受常規(guī)的絲氨酸蛋白酶抑制劑如抑肽酶、PMSF、TPCK所抑制。

             

            翌圣重組Kex2蛋白酶是由畢赤酵母表達(dá),在GMP法規(guī)下生產(chǎn),不含任何動(dòng)物源成分,無(wú)動(dòng)物源性的病毒污染,與天然的釀酒酵母Kex2酶具有相同的酶特異性。最適作用pH為pH9.0,穩(wěn)定儲(chǔ)存的pH為5.0-6.0。生物制藥領(lǐng)域常用Kex2蛋白酶聯(lián)合羧肽酶B用于重組胰島素及其類(lèi)似物、GLP-1、重組多肽的生產(chǎn)制備,還可用于蛋白質(zhì)的酶解和肽圖分析、測(cè)序及融合標(biāo)簽的切割等。

             

             

             

            選購(gòu)指南

             

            貨號(hào)

            40512ES

            20416ES

            20417ES

            20418ES

            產(chǎn)品名稱

            重組胰蛋白酶

            (粉末)

             

            重組胰蛋白酶

            (質(zhì)譜級(jí))

             

            重組羧肽酶B

            重組雙堿性內(nèi)切酶

            來(lái)源

            大腸桿菌

            畢赤酵母

            大腸桿菌

            畢赤酵母

            性狀

            白色或類(lèi)白色結(jié)晶性粉末

            無(wú)色至淡黃色,澄清液體

            白色、類(lèi)白色、類(lèi)黃色粉末

            白色、類(lèi)白色粉末

            純度

            β-trypsin≥70%

            α-trypsin≤20%

            β-trypsin80%

            α-trypsin20% 

             

            單一主條帶

            單一主條帶

            比活性

            ≥3800 USP units/mg 蛋白 

            >6800 USP Unit/mg 蛋白

             

            ≥170 USP units/mg 蛋白

            ≥10.0 units/mg 蛋白

            切割位點(diǎn)

            特異切割賴氨酸或者精氨酸殘基中的羧基端肽鍵

            特異切割賴氨酸或者精氨酸殘基中的羧基端肽鍵

            專一水解蛋白質(zhì)C-末端堿性氨基酸(賴氨酸、精氨酸)的氨基端

            特異性識(shí)別和切割A(yù)rg-Arg、Lys-Arg等雙堿性氨基酸羧基端肽鍵

            應(yīng)用

            可替代豬胰腺來(lái)源胰蛋白酶應(yīng)用于各種生物技術(shù)過(guò)程中,如:細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞發(fā)酵、蛋白質(zhì)的酶解或各種組織的細(xì)胞分離等。

            重組蛋白方面:

            1. 重組胰島素生產(chǎn);

             

            可替代重組胰蛋白酶使用,且純度更高、活性更好。其不自切的特性,尤其適用于蛋白質(zhì)分析,如蛋白質(zhì)質(zhì)譜、測(cè)序、肽圖譜分析。

            1. 重組胰島素及其類(lèi)似物的生產(chǎn)。

            2. 蛋白質(zhì)C-末端氨基酸的測(cè)定。

            3. 蛋白質(zhì)C-末端組氨酸標(biāo)簽的去除。

            4. 其他重組多肽類(lèi)物質(zhì)的生產(chǎn)。

            5. 某些特殊化合物的酶促合成

             

            1. 重組胰島素及其類(lèi)似物的前體加工

            2. 多肽藥物生產(chǎn)中的的工藝酶切

            3. 生物研究:蛋白質(zhì)的酶解和肽圖分析、測(cè)序等。

            4. 可用于融合標(biāo)簽的切割

             

             

             

            產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

             
            • 質(zhì)量高:純度高,比活高,宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求;

            • 無(wú)動(dòng)物源性:重組生產(chǎn),生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料,無(wú)外源性病毒污染;

            • GMP生產(chǎn):可提供GMP級(jí)別產(chǎn)品;

            • 供應(yīng)穩(wěn)定:批量生產(chǎn),可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn);產(chǎn)品批次間無(wú)差異,質(zhì)量穩(wěn)定;

            • 多形式供貨:可供應(yīng)液體和凍干粉2種形式,液體裝方便使用,凍干粉方便運(yùn)輸和儲(chǔ)存。

             

             

             

            產(chǎn)品信息

             

            產(chǎn)品名稱

            貨號(hào)

            規(guī)格

            目錄價(jià)/元

            PerfCell™ Recombinant Trypsin(powder)

            重組胰蛋白酶(粉末)

            40512ES10/60/80

            10 mg/100 mg

            /1 g

            328/2298/16188

            Recombinant Trypsin(MS-SAFE)

            重組胰蛋白酶(質(zhì)譜級(jí))

            20416ES60

            100 µg

            595

            Carboxypeptidase B, Recombinant, Expressed in E.coli 大腸桿菌表達(dá)重組羧肽酶B

            20417ES03/10

            1 mg/10 mg

            735/2285

            Paired-basic endopeptidase, Recombinant, Expressed in Yeast 酵母表達(dá)重組雙堿性內(nèi)切酶

            20418ES60

            100 µg

            1945



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