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            Ceturegel®基質(zhì)膠應(yīng)用——基質(zhì)膠塞實驗(plug assay)

            來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2024年01月12日 17:42  

            血管生成(angiogenesis )會與傷口愈合、炎癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病視網(wǎng)膜病變、黃斑變性和腫瘤生長等存在著密切的關(guān)聯(lián)。在生物體生長過程中,血管生成是新組織生長的重要組成部分。在成年期,除在特殊器官中受到嚴格調(diào)節(jié)的周期性事件外,由于促血管生成和抗血管生成內(nèi)源性因素之間的平衡,幾乎每個正常組織都缺乏大量的生理性血管生成。當(dāng)促血管生成方向的平衡被打亂時,微血管內(nèi)皮細胞 (EC) 會轉(zhuǎn)變?yōu)檠苌杀硇?,從而開始血管生成反應(yīng),該反應(yīng)可以被消除或加速。在研究過程中所涉及到血管生成實驗,傳統(tǒng)的體內(nèi)血管生成實驗方法有:角膜微袋、腸系膜、海綿/基質(zhì)植入物、圓盤分析 (DAS)、斑馬魚等【1】。

             

            在模型生成過程中的細胞生長維持基質(zhì)物就是來源與EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物——基質(zhì)膠來保證血管或膠塞實驗成功。Ceturegel®基質(zhì)膠不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),超低內(nèi)毒素含量,并全部經(jīng)過支原體檢測保證無支原體污染,包括基本濃度、高濃度、低生長因子等不同類型基質(zhì)膠。 

             


            Ceturegel®基質(zhì)膠

             

             

             

            應(yīng)用方向

             

             

             

             

            產(chǎn)品特點

             
            • 安全性高:不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒);

            • 濃度多樣性:濃度范圍在8~20 mg/mL之間;

            • 批次穩(wěn)定性好:嚴格生產(chǎn)質(zhì)檢過程保證批次間性能穩(wěn)定;

            • 低內(nèi)毒素:內(nèi)毒素含量<8 EU/mL;

            • 污染物檢測: 經(jīng)檢測無支原體和細菌、真菌殘留;

            • 產(chǎn)量高:產(chǎn)量在50L/月以上;

            • 兼容性好:可與任何類型的細胞培養(yǎng)基兼容。

             

             

             

            基質(zhì)膠塞實驗(plug assay)

             
             

            實驗步驟

            【2】

             
             
            1. 取3~7周的BALB/c nude小鼠放置在層流凈化屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)。

            2. 從-20℃冰箱內(nèi)取Ceturegel®基質(zhì)膠放置4℃下 12h,待其變成液態(tài)。

            3. 將小鼠按實驗分對照組、VEGFA組、肝素鈉組和VEGFA+肝素鈉組。

            4. 對照組裸鼠經(jīng)皮下注射Ceturegel®高濃度基質(zhì)膠0.5 mL,VEGFA與肝素鈉組裸鼠分別經(jīng)皮下注射添加VEGFA (20 μg/L) 、肝素鈉 (50U/mL)的基質(zhì)膠0.5 mL,VEGFA+肝素鈉組裸鼠皮下注射物為混勻VEGFA (20μg /L) 和肝素鈉 (50U/mL) 的基質(zhì)膠0.5mL,皮下注射部位為裸小鼠的腹中線附近。

            5. 1周后處死裸鼠取出基質(zhì)膠塞,嚴格根據(jù)Drabkin試劑進行血紅蛋白濃度測定。

              注:Drabkin試劑配制: 碳酸氫鈉1.0g,氫化鉀0.05g,高鐵0.2g,加蒸餾水至1 000ml即可,置4C冰箱保存。

             

             

            實驗結(jié)果

             
             

            圖.BALB/c nude培養(yǎng)7天培養(yǎng)栓塞結(jié)果

             

             

             

            FAQ

             
            Q
             

            實驗操作要注意哪些事項?

            1、高濃度基質(zhì)膠極易凝固,接種前基質(zhì)膠及注射針管冰上預(yù)冷!
            2、裸鼠皮下注射膠體積較大,進針深度要把握好,慎防漏液!
            3、正常飼喂,注意觀察注射基質(zhì)膠部位,穩(wěn)定1-2周觀察即可!

             

             

             

             

            產(chǎn)品選擇

             

            產(chǎn)品類型

            產(chǎn)品名稱

            產(chǎn)品編號

            規(guī)格

            基本濃度

            Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質(zhì)膠

            40183ES08/10

            5/10 mL

            Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

            40184ES08/10

            5/10 mL

            低生長因子

            Ceturegel® Matrix GFR,LDEV-Free 基質(zhì)膠

            40185ES08/10

            5/10 mL

            Ceturegel® Matrix GFR, Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

            40186ES08/10

            5/10 mL

             

             

            高濃度

            Ceturegel® Matrix High Concentration,LDEV-Free 基質(zhì)膠

            40187ES08/10

            5/10 mL

            Ceturegel® Matrix High Concentration,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

            40188ES08/10

            5/10 mL

            Ceturegel® Matrix High Concentration,GFR,LDEV-Free 基質(zhì)膠

            40189ES08/10

            5/10 mL

            干細胞專用

            Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基質(zhì)膠

            40190ES08/10

            5/10 mL

            類器官專用

            Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

            40191ES08/10

            5/10 mL

             

             

             

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