手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
什么是細(xì)胞培養(yǎng)？細(xì)胞培養(yǎng)是指將細(xì)胞從動(dòng)物或植物體內(nèi)取出，然后在適宜的人工環(huán)境中生長的過程。細(xì)胞可以在培養(yǎng)前直接從組織中取出并通過酶或機(jī)械方法進(jìn)行解離，也可以來源于已建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株。
原代培養(yǎng)：
原代培養(yǎng)是指細(xì)胞從組織中分離出來后，在適宜條件下增殖，直到它們占據(jù)所有可用的基質(zhì)（即達(dá)到匯合狀態(tài)）的培養(yǎng)階段。在此階段，必須通過將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮生長培養(yǎng)基的新容器中進(jìn)行繼代培養(yǎng)（即傳代），以為其提供更多的繼續(xù)生長空間。
細(xì)胞系：
第一次傳代培養(yǎng)后，原代培養(yǎng)物即被稱為細(xì)胞系。來自于原代培養(yǎng)的細(xì)胞系壽命有限（即：有限細(xì)胞系），隨著細(xì)胞的傳代，生長能力的細(xì)胞會(huì)占據(jù)優(yōu)勢(shì)，最終導(dǎo)致細(xì)胞群體在基因型和表型上達(dá)到一定程度的均一性。
細(xì)胞株：
如果通過克隆或其他方法從培養(yǎng)物中陽性篩選出了細(xì)胞系的亞群，則該細(xì)胞系成為一個(gè)細(xì)胞株。與親代細(xì)胞系起始時(shí)相比，細(xì)胞株通常會(huì)獲得一些其他的遺傳學(xué)改變。
注意事項(xiàng)：
（1）無菌操作：細(xì)菌或霉菌污染是培養(yǎng)失敗的常見原因，必須加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的無菌操作觀念，以預(yù)防為主，一旦污染，一般很難消除。
（2）培養(yǎng)液：所用的培養(yǎng)液必須滿足細(xì)胞生存和生長的必要條件。由于細(xì)胞來源的動(dòng)物種類、組織類型不同，對(duì)培養(yǎng)液的要求有一定的差異，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
（3）胎牛血清：胎牛血清對(duì)于維持培養(yǎng)細(xì)胞的生存和促進(jìn)細(xì)胞增殖起著關(guān)鍵性作用?？蛇x擇多種不同批號(hào)的胎牛血清進(jìn)行小樣分析。一旦確定某一廠家的某一批號(hào)胎牛血清后，就保持應(yīng)用至實(shí)驗(yàn)完成。
（4）：必須新鮮配制，貯存時(shí)間過長(即使是-20℃低溫保存)，也將影響消化效力，導(dǎo)致消化時(shí)間過長，細(xì)胞損傷增加。
（5）L-幾乎所有細(xì)胞對(duì)有較高的要求，細(xì)胞需要核酸和蛋白質(zhì)，在缺時(shí)，細(xì)胞會(huì)因生長不良而死亡。液中很不穩(wěn)定，加有養(yǎng)液在4℃冰箱貯存兩周以上時(shí)，就應(yīng)重新加入原來量的。
（6）靜置培養(yǎng)：原代細(xì)胞在消化分離后，置于CO2培養(yǎng)箱的頭24～48h (必要時(shí)72h)內(nèi)，應(yīng)處于絕對(duì)靜置狀態(tài)，切忌不時(shí)地取出培養(yǎng)瓶觀察生長狀況，這將使原代分離細(xì)胞難以貼壁，更談不上伸展和增殖，初學(xué)者尤應(yīng)注意。不必?fù)?dān)心培養(yǎng)液中的營養(yǎng)成分會(huì)消耗光，在細(xì)胞增殖之前對(duì)營養(yǎng)的要求并不大。原代培養(yǎng)初期僅加一薄層培養(yǎng)液的目的也在于有利于細(xì)胞貼壁伸展。
（7）消化時(shí)間：一般消化至肉眼尚可見微小組織顆粒即可，因?yàn)榇藭r(shí)組織顆粒已經(jīng)松散，略經(jīng)吹打即成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，過久的消化往往導(dǎo)致細(xì)胞損傷加重，細(xì)胞培養(yǎng)成活率降低。
（8）其他生長因子：經(jīng)過以上處理，一般原代分離細(xì)胞培養(yǎng)均可以成功。對(duì)于少數(shù)特殊類型細(xì)胞也可以考慮加一些特殊的生長因子，如胰島素能促使細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸。另外，內(nèi)毒素、EGF、FGF等均有促有絲分裂作用，但費(fèi)用較高。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心