膠原蛋白（Collagen）是一種高分子功能性蛋白質(zhì)，也是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官外基質(zhì)的主要成分，比如I型膠原在骨、跟腱、皮膚、血管壁中含量豐富；II型膠原在透明軟骨中含量豐富；III型膠原在皮膚、血管內(nèi)膜、腸道中含量豐富，彈性較好。不同類型的膠原蛋白在醫(yī)療、美容、醫(yī)學(xué)和科學(xué)研究領(lǐng)域有著重要的應(yīng)用。

其中I型膠原蛋白（Collagen, Type I）結(jié)構(gòu)上是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成300 nm長(zhǎng)的異源多聚體。當(dāng)用作凝膠時(shí)，膠原蛋白有助于體外培養(yǎng)并增強(qiáng)細(xì)胞特異性形態(tài)和功能的表達(dá)。翌圣生物生產(chǎn)的I型鼠尾膠原蛋白來(lái)源于天然小鼠鼠尾巴和SD大鼠鼠尾巴，制作的膠原蛋白產(chǎn)品溶于0.02M HAc溶液，無(wú)菌包裝?？捎糜诒右源龠M(jìn)附著，應(yīng)用包括研究腫瘤細(xì)胞侵襲和遷移，單核細(xì)胞，巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)或分化研究，以及粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的放射自顯影研究，以及維持肝細(xì)胞功能，分化狀態(tài)和肝細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄水平的升高等研究。

膠原蛋白的生產(chǎn)方式（來(lái)源：開(kāi)源證券）

翌圣生物提供來(lái)自于大鼠和小鼠尾的I型膠原蛋白，不僅產(chǎn)量足、純度高、蛋白濃度豐富，品質(zhì)更佳，且經(jīng)過(guò)具體的應(yīng)用驗(yàn)證，得到結(jié)果與預(yù)期一致。

【注意】：包被濃度為5-10 µg/cm2，推薦濃度選5 µg/cm2。建議根據(jù)具體的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行優(yōu)化。

1）膠原蛋白I用0.02 M乙酸稀釋配置50 μg/ mL工作液，膠原蛋白I不溶于中性pH溶液；

2）以5 µg/cm2涂布培養(yǎng)皿，例如：35 mm的培養(yǎng)皿的表面積約為10 cm2，1~2 mL的工作液足以覆蓋此皿；

3）室溫孵育1小時(shí)；

4）小心吸取剩余溶液，用PBS或無(wú)血清培養(yǎng)基洗滌以除去多余乙酸；

5）組織培養(yǎng)皿包被后可立即使用，也可風(fēng)干，在2-8℃無(wú)菌條件下可貯存長(zhǎng)達(dá)一周。

膠原蛋白I按以下步驟使其pH達(dá)到弱堿性時(shí)凝膠

1）將無(wú)菌5 cm左右的紗布海綿貼在150 mm培養(yǎng)皿的蓋子上來(lái)制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和，把蓋子放在150 mm的培養(yǎng)皿上，暫放置一邊；

2）將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上，厚度可以根據(jù)需要改變，膠原蛋白I（50-100 μL）足以涂覆22 mm的蓋玻片。對(duì)于直徑100 mm的培養(yǎng)皿，每個(gè)加入約6 mL; 對(duì)于60 mm培養(yǎng)皿添加約2.3 mL，對(duì)于35 mm培養(yǎng)皿添加約1 mL；

3）將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到氨蒸氣室并暴露三分鐘；

4）在無(wú)菌蒸餾水中（35 mm培養(yǎng)皿加5 mL等）浸泡涂布的蓋玻片或培養(yǎng)皿30 min。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0 mL無(wú)菌蒸餾水，放置在層流罩中過(guò)夜；

5）吸出蒸餾水，用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C。

圖.mcf-7細(xì)胞鼠尾膠原包被處理和未包被處理對(duì)比結(jié)果

圖.NIH-3T3細(xì)胞在三維膠原中生長(zhǎng)的結(jié)果