細胞是生命的基本單位。(除了病毒外。)細胞由細胞核組成和細胞膜還有線粒體等組成。(除個別生物)小到細菌大至鯨魚。都由細胞組成。
細胞培養(yǎng)實用技巧總括:
1. 買細胞要去正規(guī)的地方購買,一般產(chǎn)品資料上面會有針對細胞的詳細介紹,這樣在培養(yǎng)之前可以了解細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。
2. 不管是買的細胞,還是他人惠贈的細胞,剛拿到手需要趕緊做的兩件事:一檢測是否有支原體污染;二迅速擴增凍存,凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。
3. 發(fā)現(xiàn)細胞有污染迅速處理掉,特別是當養(yǎng)了很多種細胞時。細菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染,細胞會長的慢,可以買支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。
4. 不同細胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就足夠了。有的生長周期又特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索。
5. 對于嬌弱的細胞,就得細心呵護。yi酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間。每天都要去觀察一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況。重點每天觀察。
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