巨噬細(xì)胞的生物學(xué)功能

M1型巨噬細(xì)胞主要受到如干擾素γ（IFN-γ）和腫瘤壞死因子α（TNF-α）等細(xì)胞因子的刺激，具有促炎性特點(diǎn)。它們具有強(qiáng)烈的抗微生物活性，能夠產(chǎn)生氧自由基和炎癥因子，參與殺傷和清除細(xì)菌、病毒等病原微生物。

M1型巨噬細(xì)胞參與機(jī)體的免疫防御和炎癥反應(yīng)，促進(jìn)炎癥和免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)，協(xié)助清除感染和損傷的組織，促進(jìn)免疫炎癥反應(yīng)的發(fā)生和維持。

M2型巨噬細(xì)胞主要受到如白細(xì)胞介素-4（IL-4）和白細(xì)胞介素-13（IL-13）等細(xì)胞因子的刺激，具有抗炎和修復(fù)特點(diǎn)。它們參與組織修復(fù)和再生過(guò)程，促進(jìn)抗炎反應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)。

M2型巨噬細(xì)胞在炎癥后期和組織修復(fù)階段發(fā)揮重要作用，促進(jìn)炎癥的解析和組織修復(fù)，調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的平衡，促進(jìn)組織再生和修復(fù)。

圖1.活化巨噬細(xì)胞的主要巨噬細(xì)胞極化狀態(tài)總結(jié)[1]

巨噬細(xì)胞的體外分離、培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化

單核細(xì)胞的分離：使用密度梯度離心（如Ficoll-Paque）分離外周血單核細(xì)胞（PBMCs）。血液樣本加入到Ficoll上層，經(jīng)離心后，單核細(xì)胞會(huì)位于血漿和Ficoll層之間。

巨噬細(xì)胞的分離：從PBMCs中分離出單核細(xì)胞后，可以通過(guò)塑料黏附法進(jìn)一步分離出單核前體細(xì)胞。單核細(xì)胞在塑料培養(yǎng)皿中培養(yǎng)數(shù)小時(shí)，非黏附細(xì)胞被去除，剩余黏附的細(xì)胞主要是單核前體細(xì)胞。

組織樣本經(jīng)機(jī)械和/或酶處理（如膠原酶和DNA酶）分解成單細(xì)胞懸液。通過(guò)密度梯度離心或負(fù)選擇法（使用抗體和磁珠）去除非目標(biāo)細(xì)胞，收集巨噬細(xì)胞。

常用的培養(yǎng)基包括RPMI 1640或IMDM，通常需要添加10%的胎牛血清（FBS）、1%青霉素/鏈霉素和必要的生長(zhǎng)因子。培養(yǎng)條件通常是37°C、5% CO2的恒溫箱中。

使用M-CSF：在培養(yǎng)基中加入巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF），通常濃度為20-50 ng/mL，連續(xù)培養(yǎng)7-10天，促使單核前體細(xì)胞分化成巨噬細(xì)胞。

使用GM-CSF：使用粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）也可以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的分化，尤其是傾向于產(chǎn)生M1型（促炎型）巨噬細(xì)胞。

M1型巨噬細(xì)胞：可以通過(guò)在培養(yǎng)基中加入IFN-γ（干擾素-γ）和LPS（脂多糖）來(lái)誘導(dǎo)。

M2型巨噬細(xì)胞：通過(guò)添加IL-4和IL-13等抗炎細(xì)胞因子誘導(dǎo)。