隨著糖蛋白質組學和抗體藥研究的迅速發(fā)展，糖基化修飾也備受關注。細胞與細胞、細胞與病原體的接觸主要是通過糖與蛋白質相互作用完成的，糖基化決定了糖復合物的粘附特性。在IgG中，F(xiàn)c區(qū)Asn297處的保守N-連接糖對其活性也至關重要。此外，一些抗體還具有額外的N-糖鏈，與 Fc區(qū) Asn297處的保守位點一起影響抗體的識別、半衰期和免疫反應。

蛋白質糖基化是一種復雜的翻譯后修飾，涉及糖鏈在蛋白質特定位點的連接，依據(jù)糖鏈類型的差異，糖蛋白被分為N-連接糖蛋白、O-連接糖蛋白等；另外，蛋白質糖基化還受到宿主細胞類型和發(fā)酵條件（如培養(yǎng)基、pH值、溫度等）波動的影響。因此，糖蛋白在糖基化模式上通常具有異質性，包括糖基化位點、糖基化程度以及糖鏈的具體結構，使得糖鏈分析和結構表征工作具挑戰(zhàn)，為了程度上獲得糖鏈結構信息，目前糖鏈分析的主要策略是先把糖鏈從蛋白上游離下來，然后進行詳細的分析表征。在此策略中，高效、準確、穩(wěn)定的去糖基化方法至關重要。

酶促法是目前應用比較廣泛的去糖基化方法。

其中PNGase F (N-糖苷酶 F)是去除糖蛋白中幾乎所有 N-連接寡糖的有效的酶促方法，可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復雜的寡糖糖蛋白，特異性除去N-連接糖。切割位點為：最內側N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺殘基之間的酰胺鍵，同時將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉化為天冬氨酸。

當α1-6巖藻糖位于GlcNAc核心時，PNGase F也可以切割；只有當α1-3巖藻糖位于GlcNAc核心時（常見于植物和昆蟲糖蛋白），PNGase F不能切割。

但常規(guī)PNGase F酶促反應釋放抗體N-聚糖需要長達幾小時，同時由于聚糖釋放存在偏好性，不全的去糖基化可能導致結果的偏差，所獲得的聚糖分布不能代表治療性抗體的正確組成。因此，盡量在最短時間內獲得準確的 N-糖鏈糖譜對于抗體及抗體融合蛋白等生物治療劑生產(chǎn)過程中糖基化監(jiān)測至關重要。

Fast PNGase F，N-糖苷酶 F（快速版）是一種經(jīng)過優(yōu)化的重組試劑,可以在數(shù)分鐘內對抗體、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白進行快速的去糖基化。此酶能夠迅速且無偏好性地去除所有的 N-糖鏈，并且可直接進行下游的色譜或質譜分析。翌圣Fast PNGase F，N-糖苷酶 F（快速版） 簡化了實驗流程，可在保證靈敏度和重復性的前提下減少實驗時間。

一步法蛋白質去糖基化

兩步法蛋白質去糖基化：

另外，我司還提供常規(guī)PNGase F，包括PNGase F, N-糖苷酶 F（Cat#20407ES，比活性：100000 U/mL），PNGase F, N-糖苷酶 F（Cat#20415ES，比活性：750000 U/mL），以及其他類型的糖苷酶，如Endo H糖苷內切酶H（Cat#20414ES），Endo S糖苷內切酶S（Cat#20413ES）。