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            上新 | RNA提取輔助試劑-替代氯仿

            來(lái)源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2024年05月31日 16:30  

            氯仿是Trizol試劑提取提取RNA的必需品。由于氯仿為化學(xué)品,在訂購(gòu)、使用和儲(chǔ)存等方面有很多的法律法規(guī)要求和限制。2019年7月23日,氯仿被納入生態(tài)環(huán)境部國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)發(fā)布的《有毒有害水污染物名錄(第一批)》;2023年3月1日,氯仿又被納入《重點(diǎn)管控新污染物清單(2023年版)》。氯仿有很強(qiáng)的麻醉作用,主要作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng),造成肝,腎損害,已被流行病學(xué)證實(shí)為動(dòng)物致癌物質(zhì),危害很大。氯仿即屬于有毒試劑,又屬于管制試劑,采購(gòu)受到限制。怎么辦呢?

             


            翌圣生物推出RNA Extraction buffer RNA提取輔助試劑19203ES,該試劑安全、低毒,主要用于在Trizol、TRIeasyTM(10606ES)等RNA抽提過(guò)程中替代氯仿,快來(lái)一起了解下吧!

             

             

             

            Trizol法提取總RNA

             
             
            基本原理
             
             

            Trizol試劑可以直接從組織或細(xì)胞中提取總RNA,該試劑的成分為異硫氰酸胍、酚、8-羥基喹啉和β-巰基乙醇。在樣品裂解或勻漿的過(guò)程中,trizol試劑能迅速破碎細(xì)胞,抑制細(xì)胞釋放出來(lái)的核酸酶且保持RNA的完整性。加入氯仿離心后,樣品分為水相層和有機(jī)相層,RNA存在于水相層中,在酸性條件下總RNA保留在上層水相中。而大部分DNA和蛋白質(zhì)保留在中間相或下層有機(jī)相中。收集上述水樣層后,可通過(guò)異丙醇沉淀來(lái)回收RNA。此外,樣品中的DNA和蛋白也能以沉淀的方式還原。乙醇沉淀能析出中間層的DNA,而在有機(jī)層中加入異丙醇能沉淀出蛋白。

             

             
            主要試劑和耗材
             
             

            Trizol    氯仿   異丙醇   乙醇   離心管 RNase-Free水  槍頭

             

             
            實(shí)驗(yàn)流程圖
             
             

             

             

             

            TRIzol 無(wú)氯仿解決方案

             
             
            01
             

            加1mL TRIeasyTM(Cat#10606ES)試劑,裂解樣本,室溫孵育5 min;

            02
             

            加0.2 mL RNA Extraction buffer(Cat#19203ES) ,振蕩混勻,孵育3 min;

            03
             

            在4°C下12000×g離心樣本15 min;

            04
             

            取約500 μL上清液至新樣本管中;

            05
             

            加等樣本體積的異丙醇,顛倒混勻,在4°C下孵育10 min;

            06
             

            在4°C下12000×g離心10 min,棄上清;

            07
             

            加1mL 75%乙醇,重懸沉淀,短暫渦旋樣本,在4°C下7500×g離心5 min,棄上清液。此步驟重復(fù)一次;

            08
             

            干燥5-10 min,加20-50 μL RNase-Free水,在55°C的水浴孵育10min。

             

             

             

            19203ES

             

            RNA Extraction buffer RNA提取輔助試劑

             

             
            產(chǎn)品亮點(diǎn)
             
             

            毒性低:本產(chǎn)品與氯仿的功能非常相似,但不含氯仿,相對(duì)毒性低,是氯仿的替代品;
            分離效果好:本產(chǎn)品替代氯仿提取RNA,具有與氯仿媲美的分離效果;
            使用方便、性?xún)r(jià)比高:每個(gè)樣本添加200 μL,使用量與氯仿一致。

             

             
            產(chǎn)品性能
             
             

            采用TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent 10606ES提取10 mg魚(yú)肝樣本,實(shí)驗(yàn)組加入0.2 mL RNA Extraction buffer(Cat#19203ES),對(duì)照組加入0.2 mL氯仿,提取的RNA采用Nanodrop檢測(cè)RNA的濃度和純度,取5 μL進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。結(jié)果如圖所示,翌圣無(wú)氯仿提取后的RNA,含量高,純度好,完整性指數(shù)高。

             

            圖1.提取的RNA濃度、純度和瓊脂糖凝膠電泳圖

             

             

             

            訂購(gòu)信息

             

            產(chǎn)品名稱(chēng)

            產(chǎn)品貨號(hào)

            產(chǎn)品規(guī)格

            RNA Extraction bufferRNA提取輔助試劑(替代氯仿)

            19203ES60

            100 mL 

             

             

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            產(chǎn)品名稱(chēng)

            產(chǎn)品貨號(hào)

            產(chǎn)品應(yīng)用

            TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent

            10606ES60

            總RNA提取

            MolPure® TRIeasy Plus Total RNA Kit

            19211ES

            總RNA提取

            TRIeasyTM LS Total RNA Extraction Reagent 液體總RNA提取試劑(同TRIzol LS)

            19201ES60

            總RNA提取

            MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit

            19221ES

            細(xì)胞/組織總RNA提取

            MolPure® Cell/Tissue miRNA Kit  細(xì)胞/組織miRNA提取試劑盒

            19331ES08

            miRNA提取試劑盒

            MolPure® Plant Plus RNA Kit  多糖多酚植物RNA提取試劑盒

            19292ES08

            miRNA提取試劑盒



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