脂肪組織

文獻(xiàn)來源：PMID 21931688

文獻(xiàn)旨在探討肥胖相關(guān)的脂肪組織炎癥，特別是脂肪組織中浸潤(rùn)的巨噬細(xì)胞，是否是胰島素抵抗和2型糖尿病發(fā)展的原因。

小鼠品系：C57BL/6J 雄性小鼠。

實(shí)驗(yàn)方法：通過用普通飼料和高脂肪飼料分別喂養(yǎng)小鼠，將小鼠分為正常飲食和高脂飲食（DIO）兩組。對(duì)高脂飲食小鼠分別注射clodronate liposomes和PBS liposomes（對(duì)照組），在第一次注射后的6至7天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

注射方式：靜脈注射。

注射劑量：注射巨噬細(xì)胞清除劑兩次，劑量約110 mg/kg，中間間隔三天。

檢測(cè)方法：代謝參數(shù)檢測(cè)(小鼠的血糖、血漿胰島素水平、肝臟重量和甘油三酯含量)、高胰島素-正常血糖鉗夾實(shí)驗(yàn)、組織學(xué)檢查、RT-qPCR等。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：該研究表明通過減少內(nèi)臟脂肪組織中的巨噬細(xì)胞可以改善DIO小鼠的代謝狀況和胰島素敏感性，這部分可以歸因于adiponectin水平的增加。

圖1. 氯膦酸脂質(zhì)體對(duì)DIO小鼠脂肪中巨噬細(xì)胞消耗的影響

肝臟

文獻(xiàn)來源：PMID 31996460

文獻(xiàn)作者通過小鼠腹腔注射clodronate liposomes清除巨噬細(xì)胞，并在缺血-再灌注損傷（IRI）前通過尾靜脈注射骨髓源性巨噬細(xì)胞，以此來研究巨噬細(xì)胞在肝臟IR損傷中的作用及其潛在的分子機(jī)制。

小鼠品系：6-8周齡的雄性C57BL/6小鼠。

注射方式：腹腔注射。

注射劑量：400 μL/只。

給藥方式：注射clodronate liposomes后，為避免小鼠感染，喂食小鼠含有氨芐西林（Ampicillin，1 mg/mL）的飲用水直到小鼠死亡。

檢測(cè)方法：注射clodronate liposomes 48小時(shí)后使用免疫組織化學(xué)（圖2-A）和流式細(xì)胞儀（圖2-G）進(jìn)行檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

圖2.Roquin-1對(duì)肝臟IR損傷的影響

腫瘤

文獻(xiàn)來源：PMID 31933479
文獻(xiàn)作者通過腹腔注射clodronate liposomes的方式，根據(jù)以往的研究和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)確定的特定劑量和頻率清除小鼠體內(nèi)的巨噬細(xì)胞，以此來研究巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的影響。

小鼠品系： NSGs 小鼠。

注射方式：腹腔注射。

注射劑量：每周三次，每次6.5 mL/g。

檢測(cè)方法：生物發(fā)光成像（BLI）、免疫熒光、RT-qPCR等技術(shù)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：使用clodronate liposomes清除巨噬細(xì)胞，觀察到在原位移植的MYC/Twist1-HCC小鼠中，肝臟和肺部的轉(zhuǎn)移灶數(shù)量顯著減少，表明巨噬細(xì)胞在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中起到了重要作用。

圖3.Twist1通過巨噬細(xì)胞依賴機(jī)制誘導(dǎo)MYC-HCC轉(zhuǎn)移

胚胎小膠質(zhì)細(xì)胞

文獻(xiàn)來源：PMID 29559892

文獻(xiàn)探討在大鼠胚胎子宮內(nèi)給予針對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞（microglia，一種腦區(qū)巨噬細(xì)胞）的藥物，對(duì)于改善由巨細(xì)胞病毒（Cytomegalovirus, CMV）感染的大鼠胎兒大腦的神經(jīng)發(fā)育結(jié)果的影響。

小鼠品系：Wistar rats（RCMV-1 145-147-gfp）。

注射方式：雌性大鼠子宮內(nèi)胚胎腦室注射。

注射劑量：0.5 µL/injection。

給藥方式：在胚胎第 15 天時(shí)，實(shí)驗(yàn)組同時(shí)注射巨噬細(xì)胞清除劑（0.5 µL/injection）的和rat CMV（1.75×103 pfu），對(duì)照組注射注射含磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）的脂質(zhì)體（0.5 µL/injection），并在大鼠整個(gè)妊娠期間服用多西環(huán)素（200 mg/kg飼料)。

檢測(cè)方法：免疫組化、組織透明化、流式細(xì)胞術(shù)、共聚焦顯微鏡、RT-qPCR等技術(shù)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：使用氯磷酸鹽脂質(zhì)體耗竭小膠質(zhì)細(xì)胞和母體攝取多西環(huán)素治療均與顯著提高生存率、改善增重、改善感覺運(yùn)動(dòng)發(fā)育和降低癲癇發(fā)作風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。

圖4.氯膦酸脂質(zhì)體可消耗小膠質(zhì)細(xì)胞并減少 CMV 在發(fā)育中大腦中的傳播

胃腸道

文獻(xiàn)來源：PMID 36263186

文獻(xiàn)研究旨在探討TMP195（一種選擇性IIa類組蛋白去乙?；窰DAC抑制劑）在結(jié)直腸癌（CRC）治療中的作用及其機(jī)制?？紤]到HDAC與癌癥的密切關(guān)系，以及IIa類HDAC抑制劑與免疫功能的關(guān)聯(lián)，研究者們特別關(guān)注了TMP195對(duì)M1型巨噬細(xì)胞極化的影響，以及它與PD-1阻斷療法聯(lián)合使用的潛在治療效果。

小鼠品系：C57BL/6。

注射方式：腹腔注射。

注射劑量：200 µL/次。

給藥方式：在MC38細(xì)胞接種前兩天開始注射，每三天一次，每次200 µL，直至小鼠死亡。

檢測(cè)方法：結(jié)腸炎相關(guān)大腸癌模型、流式細(xì)胞儀、組織病理學(xué)和免疫染色、RT-qPCR、ELISA等。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：使用氯磷酸鹽脂質(zhì)體部分耗竭巨噬細(xì)胞時(shí)，TMP195的抗腫瘤效果消失，表明TMP195的療效可能依賴于巨噬細(xì)胞。

圖5.巨噬細(xì)胞消耗可削弱 TMP195 對(duì)結(jié)直腸癌的治療效果

圖6.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) M1 巨噬細(xì)胞和 T 淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)情況

腦內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞

文獻(xiàn)來源：PMID 30980832

文獻(xiàn)探討了在大鼠模型中，創(chuàng)傷性腦損傷（TBI）后立即耗竭小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)細(xì)胞和行為病理學(xué)的影響。

小鼠品系： Sprague-Dawley rat。

注射方式：顱內(nèi)注射。

注射劑量：10 µL。

給藥方式：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

圖7.氯膦酸鹽誘導(dǎo)的耗竭后皮層中的小膠質(zhì)細(xì)胞活化

肺泡巨噬細(xì)胞

文獻(xiàn)來源：PMID 22110592

研究探討了肺部缺血對(duì)肺泡巨噬細(xì)胞的影響，特別是在小鼠模型中，左肺動(dòng)脈全阻塞后，左肺與外周循環(huán)隔離，直至5-7天后新的系統(tǒng)血管進(jìn)入肺實(shí)質(zhì)。使用氯磷酸鹽脂質(zhì)體處理小鼠，耗竭單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞，并評(píng)估對(duì)血管生成的影響。

小鼠品系：C57Bl/6。

注射方式：腹腔注射+氣管給藥。

注射劑量：100 µL。

動(dòng)物模型：

給藥方式：在左肺動(dòng)脈結(jié)扎（LPAL）24小時(shí)前、LPAL后1、5、9天分別注射氯磷酸鹽脂質(zhì)體或?qū)φ誔BS脂質(zhì)體（長(zhǎng)療程），或者僅在LPAL前24小時(shí)和LPAL后24小時(shí)給予治療（短療程）。

檢測(cè)方法：細(xì)胞流式等。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：通過流式細(xì)胞術(shù)分析，確認(rèn)氯磷酸鹽脂質(zhì)體處理后巨噬細(xì)胞數(shù)量的減少情況。在短療程和長(zhǎng)療程的氯磷酸鹽脂質(zhì)體處理后，觀察到肺組織中總巨噬細(xì)胞數(shù)量的顯著減少。

圖8.LPAL 后離體左肺組織中巨噬細(xì)胞數(shù)量的變化