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            上新 | 操作簡單、快速準確!腺相關病毒(AAV)定量檢測試劑盒強勢登場!

            來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2024年06月12日 18:03  

            基因治療作為一種新興療法,是向靶細胞引入正常有功能的基因,以糾正或補償致病基因所產(chǎn)生的缺陷,從而達到治療疾病的目的。目前大多數(shù)基因治療應用的仍是病毒載體,這些病毒載體經(jīng)過改造后,已經(jīng)不具有致病性。廣泛應用的病毒載體包括腺病毒載體(ADV)、慢病毒載體(LV)、單純皰疹病毒載體(HSV)、痘病毒載體(PV)及腺相關病毒載體(AAV)。作為遞送基因療法的有力工具,AAV是目前在研基因療法項目中應用最為廣泛的病毒載體。以AAV載體為代表的基因治療藥物能修正遺傳病患者的基因缺陷,給一些遺傳性罕見病、神經(jīng)系統(tǒng)退化性疾病患者帶來了希望。

             

            AAV的衣殼蛋白以二十面體的構型聚集在一起,在結構上形成刺狀突起,這些突起介導與靶向細胞表面蛋白質的相互作用,賦予了不同類型的AAV特異性地靶向不同組織地能力。AAV2是20世紀60年代從腺病毒中發(fā)現(xiàn)的AAV載體。迄今為止,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了13種原發(fā)性AAV血清型和100多種不同的變異體。每種血清型都具有細胞靶向性,可以靶向不同的細胞組織。

             


            表1.不同AAV血清型以及它們相互作用的受體類型和組織趨向性

            AAV血清

            原代受體

            共受體

            組織特異性

            AAV2

            肝素

            AAV受體、FGFR、LamR、整合素

            中樞神經(jīng)系統(tǒng)、視網(wǎng)膜、肝臟

            AAV5

            唾液酸

            AAV受體、PDGFR

            中樞神經(jīng)系統(tǒng)、眼睛、肺

            AAV6

            唾液酸、肝素

            AAV受體、EGFR

            中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉、肺、心臟

            AAV8

            未知

            AAV受體、LamR、

            中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟、心臟、眼睛

            AAV9

            半乳糖

            AAV受體、LamR、

            中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟、心臟、肌肉

            根據(jù)AAV滴度測定不同原理,可以將其分為物理滴度測定和生物學滴度測定兩大類,生物學滴度包括感染滴度和轉導滴度。物理滴度,一般是指基因組滴度或者病毒顆粒滴度(衣殼滴度)。顆粒滴度主要是通過紫外吸光法、ELISA、HPLC等方法來測定,每種方法都有各自的優(yōu)缺點,其中ELISA因其重現(xiàn)性高、特異性好等特點而得到了廣泛的應用,這也是監(jiān)管部門所建議的滴度測定方法之一。

             

             

             

            產(chǎn)品應用

             

            翌圣生物推出腺相關病毒定量檢測試劑盒,可應用于基因治療、細胞免疫治療、干細胞治療、生物大分子藥物治療等領域的研究,又可應用于基因工程研究等基礎科研領域,還可以為基因治療、細胞免疫治療的CRO和CDMO企業(yè)進行產(chǎn)能賦能。

             

             

             

            檢測原理

             

            以99302ES-AAV2 Titration ELISA Kit為例

            99302ES是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定樣本中的AAV2衣殼含量。特異性抗AAV2單克隆抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的AAV2衣殼與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入檢測抗體孵育結合,經(jīng)洗滌,再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中AAV2衣殼的濃度成正比。加入終止液終止反應,在450 nm 波長測定吸光度值。

             

             

             

            產(chǎn)品優(yōu)勢

             
            • 準確度高

            • 靈敏度好

            • 精密度高

            • 重復性好

            • 線性范圍寬

            • 特異性高

             

             

             

            產(chǎn)品數(shù)據(jù)展示

             
             

            標準曲線

             
             

             

             

            質控數(shù)據(jù)

             
             

            Test Method

            Acceptance Criteria

            Test Result

            Precision

            3.30E+09capsids/ml(OD450nm) CV(n=10)<10%

            5.6%

            8.25E+08capsids/ml(OD450nm) CV(n=10)<10%

            5.7%

            2.06E+08capsids/ml(OD450nm) CV(n=10)<10%

            5.0%

            Accuracy

            Recovery:70%-130%

            80.9%

            Specificity

            Different serotypes of AAV was added to the solvent, murine serum, rabbit serum, sheep serum, and E. coli cell supernatant.

            There are no cross-reaction between the kit and other serotypes of AAV.

            Conforms

            Linearity

            R2≥99.0%

            99.7%

             

             

            產(chǎn)品推薦

             

             

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            貨號

            AAV2 Titration ELISA Kit

            96T

            99302ES

            AAV5 Titration ELISA Kit

            96T

            99303ES

            AAV6 Titration ELISA Kit

            96T

            99304ES

            AAV8 Titration ELISA Kit

            96T

            99305ES

            AAV9 Titration ELISA Kit

            96T

            99306ES



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