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NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)不同于標(biāo)準(zhǔn)核酸提取技術(shù)
NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)不同于標(biāo)準(zhǔn)核酸提取技術(shù)
基因組DNA提取作為分子生物學(xué)最常規(guī)技術(shù)之一是每個實驗室研究人員最熟悉的技術(shù)。而想獲得基因組DNA只需要將核酸外的結(jié)構(gòu)破壞就能夠?qū)⒑怂後尫懦鰜怼３Ｒ娪幸韵聨追N方法，包括機械力裂解、酶裂解以及化學(xué)裂解。這幾種方法的區(qū)別見下表：
方法 | 機械力裂解 | 酶裂解 | 化學(xué)裂解 |
原理 | 外力破壞細(xì)胞壁和/或細(xì)胞膜 | 消化蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)以及破壞組蛋白的纏繞 | 緩沖液體系中加入去垢劑破壞脂膜并釋放內(nèi)部成分 |
優(yōu)勢 | 操作簡單、快速 | 無需機械力 | 操作簡單 無需其他設(shè)備 |
劣勢 | 多樣本時比較耗時 處理過程中產(chǎn)熱導(dǎo)致基因組降解 基因組容易斷裂 需要研磨設(shè)備 | 價格昂貴 耗時
| 釋放的抑制物對下游擴(kuò)增有影響 不適合zhi定細(xì)胞器基因組的獲得
|
落實在產(chǎn)品上，實驗室標(biāo)準(zhǔn)核酸提取純化包括有機提取、硅膠柱離心提取、磁珠吸附提取。這幾種方法對比如下表：
方法 | 有機提取 | 硅膠柱提取 | 磁珠提取 |
原理 | 苯酚-氯仿抽提和離心進(jìn)行分離和純化 | 通過機械力和/或酶裂解釋放核酸，硅膠柱與其形成靜電吸附，通過離心和鹽粒子洗滌進(jìn)行分離純化 | 通過機械力和/或酶裂解釋放核酸，帶電磁珠與其吸附，在磁場作用下進(jìn)行分離純化 |
樣品 | 細(xì)胞、組織、植物等 | 所有樣品類型 | 所有樣品類型 |
純度 | 中 | 高 | 高 |
通量 | 低通量 | 中通量 | 高通量 |
優(yōu)勢 | 充分裂解 價格便宜 特別適合難處理樣本 | 操作方便 產(chǎn)量和純度都高 可處理多種樣本 | 產(chǎn)量高 不會堵塞 設(shè)備自動化操作 |
劣勢 | 使用有毒有害化學(xué)試劑 不易購買 | 容易堵塞 產(chǎn)量有上限 | 不利于微量樣本操作 |
耗時 | 30-60分鐘 | 30-60分鐘 | 30分鐘 |
通過對比發(fā)現(xiàn)以上方法操作復(fù)雜、費時費力且危險，為了解決這一問題，我們推薦NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)。該方法只需要5分鐘，不同溫度環(huán)境下，無需重復(fù)訓(xùn)練即可完成核酸直接釋放。結(jié)合下游開發(fā)試劑盒，wan全能夠滿足常規(guī)分子生物學(xué)實驗室的需求。
方法 | NuSmart®核酸直接釋放技術(shù) | 標(biāo)準(zhǔn)/傳統(tǒng)核酸提取法 |
原理 | 通過zhuan利試劑破壞細(xì)胞壁/膜和細(xì)胞核膜，wan全釋放基因組DNA。特殊納米材料提高PCR靈敏度 | 通過機械力和/或酶裂解細(xì)胞釋放核酸，硅膠柱等材料與其吸附，通過離心/磁場作用進(jìn)行提取純化 |
樣品 | 任何樣本類型 | 任何樣本類型 |
樣品量 | 細(xì)胞：1-103個 組織：1-2mm 植物葉片：1-4mm 微生物培養(yǎng)液：10uL | 細(xì)胞：＞106個 組織：＞10mg 植物葉片：＞100mg 微生物培養(yǎng)液：0.5-1mL |
耗時 | 5分鐘 | 30-60分鐘 |
通量 | 高通量 | 硅膠柱法：中通量 磁珠法：高通量 |
優(yōu)勢 | 對于小量和微量樣本十分友好 操作簡單，無需訓(xùn)練 基因組完整性好 無酶、無有機試劑 無大型設(shè)備投入 |
操作方便 產(chǎn)量高 純度高 |
劣勢 | — | 基因組容易斷裂 操作步驟多、費時 需要設(shè)備 |
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