尼氏染色科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹
尼氏染色
尼氏染色發(fā)明于1892年,是根據(jù)它的發(fā)明人德國(guó)科學(xué)家Franz Nissl命名的。細(xì)胞的DNA和RNA帶負(fù)電荷,這是因?yàn)樗鼈兎謩e是脫氧核糖核苷酸和核糖核苷酸組成。以脫氧核糖核苷為例,它由堿基、脫氧核糖和磷酸構(gòu)成。 其中的磷酸使DNA和RNA帶負(fù)電荷、呈酸性。尼式染色正是利用了DNA、RNA酸性的特征,用堿性的染料(比如,甲酚紫、甲苯胺藍(lán))去綁定DNA和RNA,從而將細(xì)胞著色。尼氏染色的部位主要是DNA聚集的細(xì)胞核,內(nèi)質(zhì)網(wǎng),特別是粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),其上的核糖體包含的核糖體RNA占細(xì)胞RNA總量的80%以上。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也因?yàn)槭悄崾先旧@著的染色位點(diǎn)而被稱為尼氏體。
技術(shù)原理
神經(jīng)元細(xì)胞體包括一個(gè)具有皺褶核膜的大細(xì)胞核、稀疏的染色質(zhì)和一個(gè)明顯的核仁。在細(xì)胞體中細(xì)胞質(zhì)是尼氏顆粒,即能夠代表粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并在很多神經(jīng)元中產(chǎn)生特異的斑點(diǎn)狀嗜堿性表現(xiàn)的嗜堿性顆粒。尼氏顆粒可以用很多染色來顯示如中性紅、亞甲基藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時(shí)間使一些染色既可以僅突出尼氏物質(zhì),也可以顯示神經(jīng)元的細(xì)胞核和神經(jīng)膠質(zhì)。各種神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)都含有尼氏體,但其形狀、數(shù)量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中,但不在于軸突和胞體的軸丘。尼氏體會(huì)因?yàn)樯頎顟B(tài)的變化而變化,尼氏體是神經(jīng)元內(nèi)合成蛋白質(zhì)合成的重要部位,當(dāng)神經(jīng)元受到刺激后,胞體內(nèi)的尼氏體會(huì)明顯減少。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇、亞甲藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和焦油紫等染料染成紫藍(lán)色。
實(shí)驗(yàn)流程

實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示:

注意事項(xiàng):
1、切片若為石蠟切片,要在二甲苯中先脫蠟。
2、焦油紫或硫堇的染色時(shí)間也是根據(jù)染液配制時(shí)間的新舊、切片厚度和環(huán)境溫度靈活掌握。
3、應(yīng)該在顯微鏡下觀察分色程度,使尼氏小體呈深色而背底基本無色為最佳。如分色不夠,可以退回酒精再次分色。如分色過度,也可退回再染。
4、尼氏染色應(yīng)充分脫水,否則容易褪色。
5、HE染色方法雖然也能觀察到胞質(zhì)中嗜堿性顆粒,但結(jié)構(gòu)不甚清晰,神經(jīng)元的軸突、樹突難以辨認(rèn)。在尼氏染色中尼氏體清晰可辨,而且很容易區(qū)分軸突和樹突。尼氏染色中尼氏體受染后呈塊狀(形如虎斑)或顆粒狀,核周圍尼氏體顆粒較大,近邊緣處較小而細(xì)長(zhǎng),如在生理情況下,尼氏體大而數(shù)量多,反映神經(jīng)細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的功能較強(qiáng),在神經(jīng)元受損時(shí),尼氏體的數(shù)量可減少甚至消失。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。