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CCK-8檢測(cè)試劑盒的工作原理基于WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽)在細(xì)胞內(nèi)被脫氫酶還原成橙黃色甲臢產(chǎn)物的過程。細(xì)胞增殖越多越快，則脫氫酶還原生成的甲臢產(chǎn)物越多，顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則細(xì)胞死亡越多，顏色越淺。因此，可以通過測(cè)定顏色深淺來判斷細(xì)胞活力或增殖、毒性狀態(tài)。CCK-8檢測(cè)試劑盒廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)等領(lǐng)域的研究中，如細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、藥物篩選、細(xì)胞毒性評(píng)估等。
CCK-8檢測(cè)試劑盒使用步驟：
準(zhǔn)備細(xì)胞：將待檢測(cè)的細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)密度。
加入CCK-8溶液：按照說明書要求的比例向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入CCK-8溶液。
孵育：將加入CCK-8溶液的細(xì)胞培養(yǎng)板置于適當(dāng)溫度(如37℃)下孵育一定時(shí)間(如1-4小時(shí))。
測(cè)定OD值：使用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定各孔的OD值。
注意事項(xiàng)
操作規(guī)范：在使用CCK-8檢測(cè)試劑盒時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格按照說明書操作，避免污染和誤操作。
細(xì)胞狀態(tài)：細(xì)胞的狀態(tài)和密度對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有重要影響，因此在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前要確保細(xì)胞處于良好的生長狀態(tài)。
孵育條件：孵育溫度和時(shí)間對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果也有影響，應(yīng)嚴(yán)格按照說明書要求的條件進(jìn)行孵育。
讀數(shù)準(zhǔn)確性：使用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值時(shí)，應(yīng)確保讀數(shù)準(zhǔn)確，避免誤差對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
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