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人工合成色素是以苯、甲苯、萘等化工產品為原料,經過較復雜的工藝過程合成的,故具有一定的毒性,但因其成本低,色澤鮮艷,著色力強而被廣泛使用。但使用過量會對人體產生有害作用, 因而我國規(guī)定了人工合成色素的使用*和檢測方法。至目前止, 我國批準使用的食用合成色素中zui常用的有胭脂紅、莧菜紅、檸檬黃、日落黃和亮藍等, 使用范圍于飲料、配制酒、糖果、糕點和青梅等, 禁止用于腌（蜜錢）類、魚類、及其制品（紅腸腸衣除外）, 且誘惑紅在腌（蜜錢）灌腸中*規(guī)定為0.015 g/kg, 西式火腿中*為0.025 g/kg。由于國標中人工合成色素檢測方法中沒有包括熟食腌（蜜錢）制品, 為了配合食品安全的監(jiān)督, 本文借鑒國標中人工合成色素的前處理方法, 加以改進, 對腌（蜜錢）制品中的6 種人工合成色素進行分離檢測, 得到了滿意結果。
1 材料與方法
1.1 儀器與試劑
儀器: LC-500HPLC液相色譜儀
試劑: 人工色素標液（ 檸檬黃, 莧菜紅, 胭脂紅, 日落黃, 亮藍） : 0.5 mg/mL, 國家標準物質中心提供; 誘惑紅（ 80%） : SIGMA- ALDRICH,Inc 提供; 聚酰胺粉: 100 目; 醋酸銨, 石油醚: （ 30- 60 ℃） ; 檸檬酸溶液:20 g/L; 甲醇- 甲酸溶液: （ 6∶4）V/V; 無水乙醇—氨水—水溶液: （ 7∶2∶1）V/V;甲醇（ 色譜純） ; 冰乙酸。所用試劑除甲醇外均為分析純。
、儀器配置
| Pos | Product Number | Qty |
| 1 | TZ500-010 | 2 |
| 高壓輸液泵 | ||
| LC-500A Pump Includes pump, solvent cabinet, 2 solvent bottles and CAN cable. | ||
| | ||
| 2 | TZ500-010 | 1 |
| MIXER-500靜態(tài)混合器 | ||
| Model 500 Mixer | ||
| | ||
| 4 | TZ500-016 | 1 |
| 儀器啟動工具包 | ||
| HPLC Starter Kit incl. 0.17mm id cap | ||
| | ||
| 5 | TZ500-040 | 1 |
| SPD-500可變波長紫外檢測器 | ||
| SPD-500 Variable Wavelength Detector Includes variable wavelength detector with deuterium lamp and CAN cable. No flow cell included. | ||
| | ||
| 6 | TZ500-027 | 1 |
| 7725i手動進樣閥 | ||
| | ||
| | ||
| 7 | TZ500-028 | 1 |
| C18 250*4.6 | ||
| | ||
| | ||
| 8 | TZ500-45 | 1 |
| 溶劑托盤 | ||
| | ||
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| 9 | TZ500-112 | 1 |
| 色譜工作軟件 | ||
| HPLC 2D ChemStation Software For data acquisition. | ||
| | ||
| 10 | 恒溫水浴 HH-2 | 1 |
| 柱溫箱 | ||
| | ||
| | ||
| 11 | 樣品前處理包 | 1 |
| （超聲波1臺，真空泵1臺，溶劑過濾器1套， | ||
| 濾器、濾膜各2包） | ||
| |
定量方法:外標法
1.3 樣品處理
1.4 計算
X = C ×V ×1000
m ×1000
X ─ 試樣中合成色素的含量, g/kg;
m ─ 樣品質量, g;
V ─ 樣品定容后的體積, mL;
C ─ 測定用樣品液中合成色素的濃度, mg/mL
2 結果
2.1 標準曲線線性關系實驗分別配制各組分濃度相等的混合標準系列, 濃度為0.01、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/mL （ 其中誘惑紅的濃度折算80%） , 進樣量20μL 進行液相色譜分析, 用峰面積與濃度進行線性回歸。各自的特征光譜圖如圖1 所示,及各組分的出峰情況如圖2 所示,線性方程及各自相關系數r 如表2 所示:表2! 各組分人工合成色素標準曲線回歸方程及相關系數
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2.2 zui低檢測量
采用3 倍信噪比時所對應的濃度, 由此計算出zui低檢出量為: 檸檬黃1.4×10- 5 mg/mL, 莧菜紅2.8×10- 5 mg/mL, 胭脂紅2.8×10- 5 mg/mL, 日落黃3.0×10- 5 mg/mL, 誘惑紅1.6×10- 5 mg/mL, 亮藍6.0×10- 4 mg/mL。
2.3 回收率實驗
將樣品精密量取后, 分別加入一定量的混合標準溶液制成高、中、低3 個濃度的加標樣品, 每個濃度取5 個
平行樣品, 經前處理過濾后, 用HPLC 分析測得其回收率分別為檸檬黃: 93.7%～96.2%、莧菜紅: 88.6%～95.4%、胭脂紅: 90.3%～100.3%、日落黃: 94.3%～98.7%、誘惑紅:94.8%～98.1%、亮藍: 89.8%～94.4%（ 見表3） 。
3 討論
由于國標中關于合成色素的檢測無腌（蜜錢）制品的處理方法, 故本文借鑒國標中對其他產品的處理方法, 又因檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘惑紅、亮藍等人工合成色素均為水溶性, 依據相似相溶原理采用石油醚去除腌（蜜錢）制品中的油脂, 從而減少了因油脂堵塞G3 漏斗導致的抽濾不暢, 大大提高了色素的提取速度。同時也減少了樣品中色素的損失。實現了腌（蜜錢）制品中6 種常用人工合成色素的同時快速檢測。
工藝技
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