產(chǎn)品概述

Rhodamine 123（Rh123）作為一種在細胞生物學研究中被廣泛運用的熒光染料，具有的性質(zhì)和重要的應用價值。它能夠選擇性地在活細胞的線粒體內(nèi)積聚，因此常被用于對線粒體功能及細胞活力的研究。Rh123在化學性質(zhì)方面表現(xiàn)得極，屬于親脂性陽離子染料，憑借其脂溶性可輕松透過細胞膜，并借助線粒體膜電位在線粒體內(nèi)積累。從光學角度來看，當激發(fā)波長為488 nm時，Rh123被激活，在530 nm處會發(fā)出強烈的綠色熒光。由于具有高量子的熒光發(fā)射效率，Rh123能夠產(chǎn)生高對比度的熒光信號，從而成為細胞生物學實驗中極為有用的工具。

產(chǎn)品應用

細胞活力測定：通過檢測細胞內(nèi)的Rh123熒光強度，可以評估細胞的活力狀態(tài)。

線粒體功能檢測：Rh123的熒光強度與線粒體膜電位成正比，可用于評估線粒體是否處于健康狀態(tài)。

藥物篩選：可用于篩選影響線粒體功能的藥物，評估藥物對細胞生理功能的影響。

溶液的配制

用 DMSO 溶解，終濃度為1 - 5 mM。溶液分裝，避光保存于-20oC。

使用方法

1、用載玻片準備細胞。細胞數(shù)目應為5×104～5×105個/mL。

2、孵育該載玻片，用PBS或Hanks液洗滌細胞。

3、用培養(yǎng)基稀釋Rh123母液以制備1～20 µM Rh123緩沖液。具體工作濃度取決于細胞類型和細胞濃度。

4、將Rh123緩沖液加入載玻片并在37℃下孵育30 min至1小時。

5、去除Rh123緩沖液并用培養(yǎng)基洗滌細胞（洗滌細胞后為了固定，加入10%福爾馬林緩沖液并孵育15～20 min，接著用PBS洗滌）。

6、用帶有熒光素濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。

常見問題

1. 染色不足的原因

可能是染料濃度過低或孵育時間不足。可以適當增加Rh123濃度或延長孵育時間。

2. 過度染色的原因

染料濃度過高或孵育時間過長，會引起非特異性染色?？蓢L試降低 Rh123濃度或縮短孵育時間。

3. 線粒體熒光信號弱的處理方式

①可能是細胞狀態(tài)不佳或線粒體功能受損。

②對于線粒體含量較少的細胞，可以使用較高的染料濃度和較長的孵育時間

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