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            一文詳解類器官培養(yǎng)專用基質(zhì)膠!

            來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2024年11月29日 08:40  

            2024年10月10日國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心(簡稱CDE)在其發(fā)布了《模型引導的罕見病藥物研發(fā)技術(shù)指導原則(征求意見稿)》并予以公示,為制定對應國家指導性標準來廣泛聽取各界意見和建議。在征求意見稿內(nèi)提到:非臨床研究數(shù)據(jù)包括但不限于基因、分子、細胞、類器官、器官芯片、動物研究數(shù)據(jù)等。其中提到基于類器官和器官芯片所獲得的數(shù)據(jù)也能作為非臨床研究數(shù)據(jù)的來源之一。

             

            類器官(organoids)是指一種利用干細胞、祖細胞等在體外培養(yǎng)出的3D細胞培養(yǎng)物并具有一定的空間結(jié)構(gòu)組織類似物。2021年,類器官技術(shù)被列為“十四五”國家重點研發(fā)專項[1],作為疾病模型,相比于傳統(tǒng)2D疾病模型,類器官在闡明疾病的發(fā)展、穩(wěn)態(tài)性和發(fā)病機理等與體內(nèi)環(huán)境更加接近,在多領域?qū)l(fā)揮重要,諸如細胞治療、藥物研發(fā)、基因工程、免疫研究、組織再生等領域。基質(zhì)膠作為類器官和3D培養(yǎng)的重要載體,在其中發(fā)揮著舉足輕重的作用。

             


            圖.資料源自CDE

             

            基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長因子。在室溫條件下,基質(zhì)膠聚合形成具有生物學活性的三維基質(zhì),能模擬體內(nèi)細胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能,有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化。翌圣生物開發(fā)生產(chǎn)的Ceturegel® Matrix基質(zhì)膠不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),超低內(nèi)毒素含量,包括基本濃度、高濃度、低生長因子和干細胞和類器官專用不同類型的基質(zhì)膠。

             

             

            應用方向

             

             

             
            產(chǎn)品特點
             
            • 安全性高:不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒);

            • 濃度多樣性:濃度范圍在8~20 mg/mL之間;

            • 批次穩(wěn)定性好:嚴格生產(chǎn)質(zhì)檢過程保證批次間性能穩(wěn)定;

            • 低內(nèi)毒素:內(nèi)毒素含量<8 EU/mL;

            • 污染物檢測: 經(jīng)檢測無支原體和細菌、真菌殘留;

            • 產(chǎn)量高:產(chǎn)量在50L/月以上;

            • 兼容性好:可與任何類型的細胞培養(yǎng)基兼容。

             

             
            基于腫瘤樣本應用驗證
             
            01

            樣本培養(yǎng)對比結(jié)果

            樣本編號

            癌種

            類器官數(shù)量(個)

            類器官平均直徑(μm)

            培養(yǎng)結(jié)果

            是否一致

            實驗組

            對照組

            實驗組

            對照組

            實驗組

            對照組

            CRC-Y-002

            腸癌

            20400

            21600

            124.03

            127.45

            成功

            成功

            LC-Y-001

            肺癌

            34800

            36000

            109.26

            110.39

            成功

            成功

             

            02

            樣本病理鑒定對比結(jié)果

            序號

            樣本編號

            癌種

            樣本類型

            HE&結(jié)果

            1

            CRC-Y-002

            腸癌

            組織&PDO

            一致

            2

            LC-Y-001

            肺癌

            組織&PDO

            一致

             

            03

            樣本免疫組化對比結(jié)果

             

            04

            樣本基因檢測結(jié)果

            編號

            癌種

            組織獨--有突變

            類器官獨--有突變

            共有突變

            組織突變

            類器官突變

            組織共有突變占比(%)

            類器官共有突變占比(%)

            標準偏差(%)

            CRC-Y-002

            腸癌

            16

            23

            159

            175

            182

            90.86

            87.36

            1.75

            LC-Y-001

            肺癌

            24

            14

            158

            182

            172

            86.81

            91.86

            2.52

             

            05

            樣本藥敏檢測結(jié)果

            序號

            樣本

            對照組

            實驗組

            結(jié)果判定

            IC50

            敏感性

            IC50

            敏感性

            CRC-Y-002

            腸癌

            2.10

            耐藥

            3.94

            耐藥

            真陰性TN

            1.64

            耐藥

            3.19

            耐藥

            真陰性TN

            1.76

            耐藥

            1.11

            耐藥

            真陰性TN

            LC-Y-001

            肺癌

            0.50

            敏感

            0.33

            敏感

            真陽性TP

            0.08

            敏感

            0.30

            敏感

            真陰性TN

            7.80

            耐藥

            5.09

            耐藥

            真陰性TN

            注:以上數(shù)據(jù)均為翌圣生物委托第三方獨立合規(guī)機構(gòu)做的對比實驗測定

             

             
            FAQ
             

            1、拿到的基質(zhì)有色差的變化(淡黃色到深紅色)是什么原因?

            對于含酚紅的基質(zhì)膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使基質(zhì)膠分散均勻。

             

            2、基質(zhì)膠的操作要注意哪些事項?

            所有操作需在無菌環(huán)境下進行,應使用預冷的器材以保證基質(zhì)膠正常操作。

             

            3、基質(zhì)膠的如何分裝凍存使用?

            可將凍融后的Ceturegel® Matrix基質(zhì)膠分裝在多個凍存管,凍存管需預冷,分裝后迅速冷凍并保存,避免多次凍融。

             

             
            相關(guān)產(chǎn)品
             

            產(chǎn)品名稱

            產(chǎn)品編號

            規(guī)格

            Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

            40191ES08/10

            5/10 mL

            Cebrary® Intestinal Cancer Organoid Growth Medium (Human) 腸癌類器官生長培養(yǎng)基

            41427ES50/60/76

            50/l00/500mL

            Cebrary® Lung Cancer Organoid Growth Medium (Human)  肺癌類器官生長培養(yǎng)基

            41431ES50/60/76

            50/l00/500mL

            Cebrary®Cell recovery solution for Organoid類器官回收液

            41421ES30/60

            30/100 mL

            Cebrary®Cell freezing medium for Organoid 類器官凍存液

            41422ES30/60

            30/100 mL

            ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit ATP Luminescent 細胞活力檢測試劑盒

            40210ES10/60

            10/100 mL



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