RNaseA，即核糖核酸酶A，是一種內(nèi)切核酸酶，能夠特異性地降解RNA分子。它能夠在嘧啶殘基的3’末端切割單鏈RNA，形成具有3’-末端嘧啶-3’-磷酸酯的寡核糖核苷酸。通過RNaseA的切割作用，相鄰的嘧啶核苷酸會被釋放，從而實(shí)現(xiàn)RNA分子的降解。

在DNA和質(zhì)粒提取過程中，RNAseA起到了至關(guān)重要的作用。由于一些實(shí)驗(yàn)和應(yīng)用中需要獲得純凈的DNA樣本或質(zhì)粒樣本，而RNA的存在可能會干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，因此，在提取DNA時(shí)，通常會添加RNaseA來降解樣品中的RNA分子。

RNaseA對DNA分子并不具有降解作用。DNA分子具有穩(wěn)定的雙鏈結(jié)構(gòu)，不容易被酶降解。因此，在使用RNaseA時(shí)，可以確保DNA分子的完整性和濃度不受影響。這一特性使得RNaseA成為DNA提取過程中的工具。

在使用RNaseA時(shí)，也需要注意酶的濃度和反應(yīng)時(shí)間。過高的酶濃度或過長的反應(yīng)時(shí)間可能會導(dǎo)致DNA分子也被部分降解，從而影響提取得到的DNA的完整性和濃度。因此，在使用RNaseA時(shí)，需要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜆悠诽匦赃M(jìn)行優(yōu)化，以確保得到高質(zhì)量的純凈DNA樣本。

在使用RNaseA時(shí)，需要注意對RNA相關(guān)實(shí)驗(yàn)的污染，做RNA相關(guān)實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要使用Surface RNase Remover (with Spray Bottle) 固相RNase清除劑（含噴霧瓶）（10609ES）清除RNase，從而創(chuàng)造潔凈的RNA工作環(huán)境。

DNase I，即Deoxyribonuclease I，中文名稱為脫氧核糖核酸酶I，是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA產(chǎn)生單脫氧核苷酸或單鏈或雙鏈的寡脫氧核苷酸的核酸內(nèi)切酶。DNase I水解單鏈或雙鏈DNA后的產(chǎn)物，5'端為磷酸基團(tuán)，3'端為羥基。雖然DNase I裂解通常被認(rèn)為是非特異性裂解，但DNase I更有可能作用于某些序列片段，如小溝區(qū)，并且更容易發(fā)生嘌呤-嘧啶序列的裂解。然而，當(dāng)DNase I作用于異質(zhì)dsDNA時(shí)，所有四個(gè)堿基都將被切開，對特定堿基的影響不會超過其他堿基的3倍。

1、核酸提取中制備不含DNA的RNA樣品：

在RNA提取過程中，DNase I可用于消化掉提取核酸中所殘留的DNA成分，從而得到高純度的RNA產(chǎn)物。這對于后續(xù)如mRNA表達(dá)量分析、轉(zhuǎn)錄組分析等實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。

2、RT-PCR反應(yīng)前去除DNA污染：

在進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)前，RNA樣品中可能存在的基因組DNA等DNA污染會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。DNase I可以有效地去除這些DNA污染，確保RT-PCR反應(yīng)的準(zhǔn)確性。

3、體外轉(zhuǎn)錄后去除DNA模板：

在體外轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)中，如使用T7、T3、SP6等RNA聚合酶進(jìn)行RNA合成時(shí)，合成后的RNA可能會有DNA殘留。DNase I可用于去除這些模板DNA殘留，特別是在mRNA疫苗生產(chǎn)制作等需要高純度RNA的場合。

4、DNase I足跡實(shí)驗(yàn)：

DNase I足跡實(shí)驗(yàn)（DNase I footprinting）是一種研究DNA-蛋白質(zhì)相互作用的方法。通過DNase I對DNA的切割作用，可以揭示出與蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA區(qū)域，從而了解DNA與蛋白質(zhì)之間的相互作用關(guān)系。