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            HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶:耐高鹽,助力蛋白純化研究

            來源:上海起發(fā)實驗試劑有限公司   2025年01月21日 16:52  

            HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶:耐高鹽,助力蛋白純化研究

            在蛋白質(zhì)純化、病毒載體制備等生物醫(yī)藥研究生產(chǎn)過程中,核酸污染,尤其是宿主基因組DNA污染是一個非常關鍵的問題。宿主DNA的殘留不僅會影響目標產(chǎn)物的純化效果,還可能引發(fā)機體的免疫反應,因此受到嚴格監(jiān)管。傳統(tǒng)核酸酶在高鹽條件下活性較弱,而 HL-SAN 25k 作為一種耐高鹽的非特異性核酸內(nèi)切酶,在高鹽濃度(如 0.5 M NaCl)下表現(xiàn)出優(yōu)異的活性,能夠高效去除宿主DNA。

            作為arcticzymes公司中國經(jīng)銷商,上海起發(fā)強烈推薦arcticzymes熱銷產(chǎn)品HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

            HL-SAN是一種非特異性內(nèi)切核酸酶,適用于高鹽濃度下的核酸去除。該酶能夠在蛋白質(zhì)純化過程中去除污染的核酸,同時保護蛋白質(zhì)的完整性。它能夠以大約10:1的比例消化DNA和RNA。

            酶學特性

               來源:重組表達于畢赤酵母細胞。

               酶比活:≥1.75×105 Units/mg。

               酶活定義:在37℃,25 mM Tris-HCl(pH 8.5),5mM MgCl2,500 mM NaCl的反應體系中,1個單位的HL-SAN在30分鐘內(nèi)消化50 µg/ml的小牛胸腺DNA,可以在OD260nm處產(chǎn)生1A的吸光值變化。

               特異性:非特異性內(nèi)切核酸酶,能夠?qū)捂満碗p鏈DNA及RNA消化成5-13個堿基的寡核苷酸。

            最佳活性條

               溫度:7-38℃和4°C過夜,最佳溫度為30-38℃。

               鹽濃度:0-1000 mM(NaCl/KCl),最佳濃度為400-700 mM。

               pH范圍:6.8-9.5,最佳pH為8.0-8.9。

              Mg2+濃度:>1 mM,最佳濃度為5-50 mM。

            產(chǎn)品優(yōu)勢

               非特異性內(nèi)切核酸酶,適用于高鹽濃度(0.5 M NaCl)下的核酸去除。

               在低溫(6℃)下仍保持20%的活性。

               寬pH范圍和溫度穩(wěn)定性。

               適用于高鹽緩沖液中的核酸去除。

            應用領域

               蛋白純化:高效去除與蛋白質(zhì)結(jié)合的核酸,尤其適用于DNA結(jié)合蛋白。

               病毒載體制備:如腺相關病毒(AAV)和腺病毒(AdV)。

               宏基因組測序(mNGS):去除宿主DNA,提高病原體檢測效率。

               其他應用:降低樣品粘度,去除核酸污染。

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            品牌

            70910-202

            HL-SAN 25k

            25000 U

            25 U/uL

            arcticzymes



            實驗展示

            HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶:耐高鹽,助力蛋白純化研究


                   圖左:通過未釋裂解液和His-trap洗脫液的瓊脂糖凝膠電泳顯示,在這兩種情況下,大部分DNA仍保留在其中,添加了HL-SAN極大地減少了粗裂解液中的DNA含量

                   圖右:通過qPCR檢測His-trap洗脫液中的大腸桿菌23S DNA,結(jié)果顯示添加了HL-SAN將DNA含量減少了約10,000倍。


            HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶:耐高鹽,助力蛋白純化研究

               圖2:與未處理的樣品相比,在裂解液中添加了HL-SAN處理的DNA將10,000倍流速減少;洗脫液中減少約為200倍。而同時處理裂解液和洗脫液,添加了HL-SAN可將DNA減少約4,000倍。


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