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            無血清細胞凍存液對比傳統(tǒng)細胞凍存液的優(yōu)勢

            來源:賽爾瑞成(北京)生命科學技術有限公司   2025年02月12日 10:11  

            細胞凍存是細胞培養(yǎng)技術中細胞進行保種并長期保存的常用方法,其中細胞凍存液,作為細胞凍存時必須使用的一種溶液,不僅僅是說只是用來進行細胞的保存,在細胞的購買、寄贈、交換和運送過程中也起著關鍵作用,因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要。

            如果不加任何條件直接凍存細胞,細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,能導致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等,從而引起細胞死亡。而細胞凍存液就相當于細胞的保護劑,在凍存細胞時將細胞懸浮于凍存液中,可使冰點降低,提高細胞膜對水的通透性,在緩慢的凍結(jié)條件下,能使細胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細胞,可以防止或減少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。這樣就使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,在需要時直接復蘇就可恢復細胞活性。

            傳統(tǒng)細胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,傳統(tǒng)細胞凍存液的凍存方法一般是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜),最后才移至液氮罐中進行長期的儲存。
            (其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量的死亡。)

            可見,傳統(tǒng)細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題:

            1. 凍存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,此步可省略)
            2. 需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時耗力
            3. 含血清,細胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風險更高
            4. 血清批次、品質(zhì)間差異導致凍存液的批次間差異
            5. 需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存

            CRD10無血清細胞凍存液是不含血清和動物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細胞凍存液。

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            CRD10無血清細胞凍存液的凍存方法是:將細胞凍存懸液(凍存管或孔板)直接放置-80℃冰箱/液氮保存。

            可見,CRD10無血清細胞凍存液相對于傳統(tǒng)細胞凍存液的優(yōu)勢有:

            1. 即用型,無需現(xiàn)配,直接將細胞懸浮于凍存液中即可
            2. 通用型,適用于凍存各種細胞系、原代細胞
            3. 無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單
            4. 不含血清,大大減少細胞污染
            5. 因不含血清,批次間差異小
            6. -80℃冰箱/液氮均可凍存
            7. 可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細胞凍存時可節(jié)省篩選過程



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