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            卻普曼瓊脂培養(yǎng)基原理及現(xiàn)象

            來源:青島高科技工業(yè)園海博生物有限公司   2025年02月14日 15:44  

            一、用途及原理

              該培養(yǎng)基用于金黃色葡萄球菌的檢測(cè)。

              蛋白胨、酵母浸粉提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng),磷酸氫二鉀為緩沖劑,甘露醇為可發(fā)酵碳源,較高濃度的氯化鈉可抑制不耐鹽細(xì)菌的生長(zhǎng),高濃度的硫酸銨可使明膠發(fā)生沉淀析出,培養(yǎng)基呈不透明狀。金黃色葡萄球菌可耐高滲環(huán)境,能在此培養(yǎng)基中生長(zhǎng),將不溶性大分子的明膠分解為小分子可溶性的氨基酸,菌落周圍的培養(yǎng)基變?yōu)橥该鳡?。金黃色葡萄球菌還可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產(chǎn)酸,培養(yǎng)結(jié)束后,滴加酸堿指示劑可觀察產(chǎn)酸現(xiàn)象。


            二、培養(yǎng)基配方(g/L)

            蛋白胨

            10.0

            酵母浸出粉

            2.5

            磷酸氫二鉀

            5.0

            明膠

            30.0

            甘露醇

            10.0

            氯化鈉

            55.0

            硫酸銨

            75.0

            瓊脂

            15.0

            pH

            7.2±0.2


            三、配制方法

              稱取本品202.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15min,冷卻至45-50℃左右時(shí),傾入無菌平皿,備用。

              注:培養(yǎng)基中含有較多的明膠及硫酸銨,滅菌冷卻后應(yīng)搖勻立即在陰涼環(huán)境倒平板,使平板能夠快速凝固,制成的平板應(yīng)為均一渾濁不透明狀態(tài)。不可長(zhǎng)時(shí)間在50℃左右保溫,培養(yǎng)基易凝固;傾注平板前必須搖勻且能保證倒好的平板能快速凝固,若制成的平板呈透明狀態(tài),通常是因培養(yǎng)基未搖勻或凝固過慢導(dǎo)致的。


            四、生長(zhǎng)現(xiàn)象及結(jié)果觀察

              接種以下質(zhì)控菌株,在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時(shí):

            質(zhì)控菌株

            菌株編號(hào)

            生長(zhǎng)情況

            其他特征

            金黃色葡萄球菌

            ATCC25923

            +++

            菌落周圍有透明環(huán),產(chǎn)酸

            表皮葡萄球菌

            CMCC26069

            +++

            菌落周圍有透明環(huán),不產(chǎn)酸




            表皮葡萄球菌
            金黃色葡萄球菌


              發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸現(xiàn)象觀察:用棉簽除去平板上的菌落,在瓊脂表面滴加0.04%溴甲酚紫溶液,可同時(shí)在無菌落生長(zhǎng)的空白位置加1滴做為對(duì)照,若滴加的溴甲酚紫變黃,說明該菌可發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸。





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