在生命科學(xué)研究領(lǐng)域，細(xì)胞解離是眾多實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵起始步驟，從原代細(xì)胞培養(yǎng)到組織工程研究，都離不開高效且溫和的細(xì)胞解離方法。Ⅳ 型膠原蛋白在多種組織中廣泛存在，尤其是基底膜。因此，針對(duì)富含 Ⅳ 型膠原蛋白組織的細(xì)胞解離，一款優(yōu)質(zhì)的 Ⅳ 型膠原蛋白酶至關(guān)重要。Worthington 的 Collagenase, Type 4 憑借優(yōu)異性能，有效解決了細(xì)胞解離過程中的諸多難點(diǎn)，成為科研人員的得力助手。作為Worthington公司的中國授權(quán)代理，上海起發(fā)強(qiáng)烈推薦其Collagenase, Type 4型膠原酶產(chǎn)品。

突破傳統(tǒng)細(xì)胞解離難點(diǎn)

攻克組織特異性消化難題

不同組織的細(xì)胞外基質(zhì)成分差異顯著，在富含 Ⅳ 型膠原蛋白的組織，如腎臟、肺臟等的基底膜以及一些腫瘤組織中，實(shí)現(xiàn)高效消化且不損傷細(xì)胞并非易事。傳統(tǒng)的酶解方法往往缺乏特異性，容易對(duì)細(xì)胞造成過度損傷，影響細(xì)胞的生物學(xué)特性。Worthington 的 Ⅳ 型膠原蛋白酶對(duì) Ⅳ 型膠原蛋白具有高度特異性，能夠精準(zhǔn)識(shí)別并切割 Ⅳ 型膠原蛋白的特定肽鍵。這一特性使得在處理富含 Ⅳ 型膠原蛋白的組織時(shí)，它能夠高效地分解細(xì)胞外基質(zhì)，將細(xì)胞從組織中解離出來，同時(shí)很大程度地保護(hù)細(xì)胞的完整性和活性。例如，在腎臟組織的解離實(shí)驗(yàn)中，該酶能夠在溫和的條件下，快速且準(zhǔn)確地切斷 Ⅳ 型膠原蛋白的連接，釋放出高活性的腎細(xì)胞，為腎臟疾病研究、藥物篩選等實(shí)驗(yàn)提供了優(yōu)質(zhì)的細(xì)胞樣本。

消化效率與細(xì)胞損傷平衡的精妙把握

在細(xì)胞解離過程中，消化效率與細(xì)胞損傷之間的平衡是一個(gè)關(guān)鍵挑戰(zhàn)。消化時(shí)間過長或酶濃度過高，雖能提高消化效率，但會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可逆的損傷，影響細(xì)胞的后續(xù)功能；而消化時(shí)間過短或酶量不足，則無法實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的有效分離。Worthington 的 Ⅳ 型膠原蛋白酶通過優(yōu)化的酶活性配方和作用機(jī)制，在保證高效消化的同時(shí)，顯著降低對(duì)細(xì)胞的損傷。其酶切動(dòng)力學(xué)特性經(jīng)過精心設(shè)計(jì)，使得在較短的消化時(shí)間內(nèi)，就能實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的充分解離。實(shí)驗(yàn)表明，使用該酶進(jìn)行細(xì)胞解離，細(xì)胞在解離后能夠迅速恢復(fù)正常的生理功能，存活率高，為后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞生物學(xué)研究等提供了良好的基礎(chǔ)。

產(chǎn)品優(yōu)勢

• 低胰蛋白酶活性：保護(hù)細(xì)胞完整性

Collagenase, Type 4的核心優(yōu)勢在于其極低的胰蛋白酶活性。這種特性使其在細(xì)胞分離過程中能夠有效減少對(duì)細(xì)胞膜蛋白和受體的損傷，從而更好地保留細(xì)胞的完整性和功能。這對(duì)于胰島細(xì)胞分離等對(duì)細(xì)胞活性要求很高的實(shí)驗(yàn)尤為重要。

• 高效的膠原降解能力

Collagenase, Type 4源自Clostridium histolyticum，是一種高效的基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）和鋅肽酶。它能夠特異性地降解IV型和VII型膠原蛋白，這些是基底膜的主要成分。其高效的膠原降解能力使其在組織解離和細(xì)胞分離中表現(xiàn)出色，尤其是在處理胰島細(xì)胞、軟骨等組織時(shí)。

訂購信息

品名：4型膠原酶（Collagenase Type 4）

貨號(hào)：LS004188（1g規(guī)格）、LS004186（100mg規(guī)格）

產(chǎn)品形式：透析后的凍干粉末

儲(chǔ)存條件：2~8℃保存，避光防潮，密閉干燥

溶解與保存：Collagenase, Type 4為凍干粉，可在2-8℃下保存。溶解時(shí)需使用TESCA緩沖液（50 mM TES, 0.36 mM氯化鈣，pH 7.4），溶解后可分裝于-20℃凍存。

工作濃度：通常使用0.1-5 mg/mL的濃度進(jìn)行組織消化，反應(yīng)時(shí)間根據(jù)組織類型和實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整。

使用方法

（一）溶液配制

溶解：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，將Collagenase, Type 4溶解于無菌的緩沖液中（如Hanks平衡鹽溶液或PBS）。推薦濃度為1-2mg/ml。

過濾：使用0.22µm濾膜過濾，去除雜質(zhì)和可能的微生物污染。

儲(chǔ)存：配制好的溶液可在4°C下保存，建議在24小時(shí)內(nèi)使用。

（二）細(xì)胞分離步驟

組織處理：

將組織樣本清洗干凈，去除血跡和雜質(zhì)。

將組織切成小塊（約1-2mm3），放入含有Collagenase, Type4溶液的離心管中。

消化：

在37°C水浴或培養(yǎng)箱中進(jìn)行消化，消化時(shí)間根據(jù)組織類型和細(xì)胞類型而定，通常為30分鐘至2小時(shí)。

消化過程中可輕輕搖晃離心管，以促進(jìn)酶與組織的接觸。

終止消化：

消化完成后，加入適量的終止液（如含10%胎牛血清的培養(yǎng)基）終止反應(yīng)。

通過離心（1000rpm，5分鐘）收集細(xì)胞。

細(xì)胞洗滌與培養(yǎng)：

用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞，去除殘留的酶。

將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中，進(jìn)行后續(xù)培養(yǎng)。

廣泛應(yīng)用，助力科研

1. 胰島細(xì)胞分離

Collagenase, Type 4常用于胰島細(xì)胞的分離。由于其低胰蛋白酶活性，能夠有效減少對(duì)細(xì)胞膜蛋白和受體的損傷，從而更好地保留細(xì)胞的完整性和功能。

2. 腫瘤組織處理

該酶可用于消化富含膠原蛋白的腫瘤組織，如乳腺癌、結(jié)直腸癌和胰腺癌等。通過將腫瘤組織解離為單個(gè)細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，可進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞周期分析、基因表達(dá)檢測等實(shí)驗(yàn)，同時(shí)也有助于建立腫瘤細(xì)胞系。

3. 原代細(xì)胞分離

Collagenase, Type 4適用于多種原代細(xì)胞的分離，例如：

腎細(xì)胞：從腎臟組織中分離腎小管細(xì)胞或腎小球細(xì)胞，用于腎臟疾病模型研究。

軟骨細(xì)胞：從軟骨組織中分離軟骨細(xì)胞，用于軟骨修復(fù)或再生研究。

髓系細(xì)胞：用于制備髓系細(xì)胞，研究其在免疫系統(tǒng)中的功能。

4. 組織工程與再生醫(yī)學(xué)

在組織工程中，Collagenase, Type 4可用于處理天然組織，去除細(xì)胞成分后保留細(xì)胞外基質(zhì)作為支架材料。例如，在人工皮膚構(gòu)建中，該酶可去除皮膚細(xì)胞，保留細(xì)胞外基質(zhì)作為支架，用于種植皮膚細(xì)胞。

5. 細(xì)胞外基質(zhì)研究

該酶能夠特異性降解膠原蛋白，適用于細(xì)胞外基質(zhì)的降解與分析，幫助研究其組成和功能。

6. 其他應(yīng)用

消化腸系膜脂肪組織：作為磷酸鹽緩沖生理鹽水的補(bǔ)充劑，用于消化已切除的腸系膜脂肪組織。

消化睪丸組織：用于消化去被膜的睪丸，制備相關(guān)細(xì)胞。

子宮內(nèi)膜組織消化：用于消化子宮內(nèi)膜組織，研究其細(xì)胞功能。

Worthington是一家創(chuàng)始于1947年，位于美國新澤西州的生產(chǎn)高純度酶類及相關(guān)生化藥劑的世界頂尖公司。Worthington通過ISO9001認(rèn)證，致力于為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)。供應(yīng)的生物藥劑主要純化于牛胰腺、植物、發(fā)酵產(chǎn)物及其他自然資源，Worthington專長的蛋白提取與純化技術(shù)保證了其所提供酶類擁有與其提取來源物中同等的生物活性，從而保證了研究結(jié)果的可靠性和穩(wěn)定性。目前Worthington提供的產(chǎn)品覆蓋細(xì)胞分離消化酶、DNA酶、RNA酶等幾乎所有生命科學(xué)研究領(lǐng)域。其產(chǎn)品適用于單細(xì)胞測序，流式細(xì)胞分選，細(xì)胞治療等領(lǐng)域的細(xì)胞分離、疫苗生產(chǎn)和生物制品加工。

Worthington的Collagenase, Type 4憑借其高效、溫和的特性，成為細(xì)胞分離和組織解離領(lǐng)域的理想選擇，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究的多個(gè)方向。