美國(guó) Zeta life-Advanced RNA 轉(zhuǎn)染試劑 2025 年全新升級(jí) 產(chǎn)品概述

來(lái)源：上海徠同生物科技有限公司 2025年02月24日 10:08

美國(guó) Zeta life-Advanced RNA 轉(zhuǎn)染試劑 2025 年全新升級(jí)

產(chǎn)品概述

Advanced RNA 轉(zhuǎn)染試劑，產(chǎn)品貨號(hào)為 AD300025，以下是其詳細(xì)的操作說(shuō)明書(shū)。

一、試劑盒組分

Advanced RNA 轉(zhuǎn)染試劑：貨號(hào) AD30，是實(shí)現(xiàn)高效 RNA 轉(zhuǎn)染的關(guān)鍵成分。
稀釋液：貨號(hào) X-DS，用于稀釋轉(zhuǎn)染試劑，以確保其在轉(zhuǎn)染過(guò)程中發(fā)揮最佳性能。

二、注意事項(xiàng)

培養(yǎng)基使用：轉(zhuǎn)染復(fù)合物可直接轉(zhuǎn)入含有血清的培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作。轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后需更換培養(yǎng)基，48 小時(shí)后收集細(xì)胞用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。特別注意，轉(zhuǎn)染所用的含血清培養(yǎng)基中不應(yīng)含有雙抗，以免影響轉(zhuǎn)染效果。
siRNA 純度：使用高純度的 siRNA 對(duì)提高轉(zhuǎn)染效率至關(guān)重要。高純度的 siRNA 能夠減少雜質(zhì)干擾，確保轉(zhuǎn)染過(guò)程順利進(jìn)行。
試劑用量：建議轉(zhuǎn)染試劑的用量為 0.1 μL/pmol siRNA，以達(dá)到理想的轉(zhuǎn)染效果。
siRNA 濃度：siRNA 的實(shí)驗(yàn)濃度推薦為 40 nM，在此濃度下能夠有效實(shí)現(xiàn)基因沉默等實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/span>
儲(chǔ)存條件：本產(chǎn)品應(yīng)儲(chǔ)存于 4°C 環(huán)境中，嚴(yán)禁凍融，以保證其活性和穩(wěn)定性。產(chǎn)品的有效期為 1 年，請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用。

三、簡(jiǎn)易操作說(shuō)明

核酸準(zhǔn)備要求：實(shí)驗(yàn)中使用的 RNA 濃度需達(dá)到 20 uM /L，確保 RNA 質(zhì)量和濃度符合實(shí)驗(yàn)要求。
操作流程

細(xì)胞接種：提前 1 天進(jìn)行細(xì)胞接種，確保在轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度達(dá)到 70-90%，為轉(zhuǎn)染提供良好的細(xì)胞狀態(tài)。
稀釋轉(zhuǎn)染試劑：根據(jù)參考用量，使用稀釋液（貨號(hào) X-DS）對(duì) Advanced RNA® 轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行稀釋，確保轉(zhuǎn)染試劑的濃度合適。
加入 siRNA 溶液：向稀釋后的轉(zhuǎn)染試劑中加入 siRNA 溶液，并充分混勻，使轉(zhuǎn)染試劑與 siRNA 充分結(jié)合。
孵育形成復(fù)合物：將 siRNA 與轉(zhuǎn)染試劑的混合液在室溫下孵育 20-30 分鐘，形成穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染復(fù)合物。若希望達(dá)到更佳的轉(zhuǎn)染效果，也可在 37℃下進(jìn)行孵育。
加入復(fù)合物到細(xì)胞中：根據(jù)參考用量，將孵育好的復(fù)合物加入到細(xì)胞中，確保復(fù)合物能夠有效進(jìn)入細(xì)胞。
結(jié)果分析：細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng) 2-3 天后，對(duì)轉(zhuǎn)染效果進(jìn)行檢測(cè)和分析，評(píng)估轉(zhuǎn)染的效率和效果。

四、以細(xì)胞培養(yǎng)板為例的轉(zhuǎn)染試劑及 RNA 用量梯度說(shuō)明

培養(yǎng)器皿	siRNA 濃度	每孔體積	轉(zhuǎn)染試劑	轉(zhuǎn)染試劑稀釋液	20μM siRNA	培養(yǎng)基
96-well	100 nM	100 μL	1 μL	10 μL	0.5 μL	88.5 μL
96-well	40 nM	100 μL	0.4 μL	10 μL	0.2 μL	89.4 μL
96-well	20 nM	100 μL	0.2 μL	10 μL	0.1 μL	89.7 μL
96-well	10 nM	100 μL	0.1 μL	10 μL	0.05 μL	89.85 μL
24-well	100 nM	500 μL	5 μL	50 μL	2.5 μL	442.5 μL
24-well	40 nM	500 μL	2 μL	50 μL	1 μL	447 μL
24-well	20 nM	500 μL	1 μL	50 μL	0.5 μL	448.5 μL
24-well	10 nM	500 μL	0.5 μL	50 μL	0.25 μL	449.25 μL
12-well	100 nM	1 mL	10 μL	100 μL	5 μL	885 μL
12-well	40 nM	1 mL	4 μL	100 μL	2 μL	894 μL
12-well	20 nM	1 mL	2 μL	100 μL	1 μL	897 μL
12-well	10 nM	1 mL	1 μL	100 μL	0.5 μL	898.5 μL
6-well	100 nM	2 mL	20 μL	200 μL	10 μL	1770 μL
6-well	40 nM	2 mL	8 μL	200 μL	4 μL	1788 μL
6-well	20 nM	2 mL	4 μL	200 μL	2 μL	1794 μL
6-well	10 nM	2 mL	2 μL	200 μL	1 μL	1797 μL

本產(chǎn)品僅用于科研用途，嚴(yán)禁用于臨床診斷或治療等其他用途。

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