CHO細(xì)胞全解析|生物制藥的核心載體
一、CHO細(xì)胞概要
?CHO細(xì)胞(Chinese hamster ovary cell)?是一種從中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞中分離出來(lái)的細(xì)胞系,具有無(wú)限分裂的能力,常用于生物制藥中的重組蛋白生產(chǎn)。CHO細(xì)胞具有多種優(yōu)點(diǎn),如快速生長(zhǎng)、易于培養(yǎng)、高產(chǎn)量等,因此被廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是在蛋白質(zhì)表達(dá)和純化方面表現(xiàn)出色?
全稱(chēng):Chinese Hamster Ovary(中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)
建系時(shí)間:1957年由Theodore Puck團(tuán)隊(duì)建立
二、CHO細(xì)胞關(guān)鍵特性
蛋白翻譯后修飾能力(糖基化模式近人源)
懸浮培養(yǎng)適應(yīng)性(可達(dá)20×10? cells/mL密度)
基因組穩(wěn)定性(平均染色體數(shù)21條)
三、CHO細(xì)胞技術(shù)演進(jìn)史
注:當(dāng)前量產(chǎn)抗體表達(dá)量>5g/L
四、CHO細(xì)胞核心應(yīng)用領(lǐng)域
應(yīng)用場(chǎng)景 | 代表產(chǎn)物 | 全球份額 |
單克隆抗體 | 阿達(dá)木單抗(修美樂(lè)) | 62% |
融合蛋白 | Etanercept(恩利) | 18% |
酶替代治療 | 阿葡萄糖苷酶α | 9% |
病毒疫苗 | 流感病毒樣顆粒疫苗 | 新增長(zhǎng)領(lǐng)域 |
五、CHO 細(xì)胞產(chǎn)業(yè)化優(yōu)勢(shì)與局限
? 核心優(yōu)勢(shì)
人源化N-糖基化(降低免疫原性)
耐受長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)灌流培養(yǎng)(90天+)
可構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)克?。ǎ?/span>100代穩(wěn)定性)
?? 技術(shù)瓶頸
培養(yǎng)成本昂貴(無(wú)血清培養(yǎng)基$200/L)
潛在病毒污染風(fēng)險(xiǎn)(需三重除病毒過(guò)濾)
蛋白過(guò)度甘露糖化問(wèn)題(影響半衰期)
六、CHO細(xì)胞關(guān)鍵操作規(guī)范
1. 培養(yǎng)條件
溫度:37℃(對(duì)數(shù)期)→32℃(生產(chǎn)期)
pH控制:6.8-7.2(碳酸鹽緩沖系統(tǒng))
2. 轉(zhuǎn)染試劑選擇
聚乙烯亞胺(PEI)轉(zhuǎn)染效率>75%
電穿孔法適用于難轉(zhuǎn)染克隆
3. 篩選系統(tǒng)
DHFR/MTX系統(tǒng)(甲氨蝶呤加壓篩選)
GS/MSX系統(tǒng)(蛋氨酸硫代類(lèi)似物)
七、購(gòu)買(mǎi)渠道
【ATCC代理——天津益元利康生物科技有限公司】
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