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            果膠酶(PG)檢測試劑盒(DNS比色法)產(chǎn)品介紹

            來源:青島捷世康生物科技有限公司   2025年03月20日 10:21  

            產(chǎn)品簡介:

            天然果膠類物質(zhì)以原果膠、果膠(Pectin)、果膠酸的形態(tài)廣泛存在于植物的果實(shí)、根、莖、葉中,是細(xì)胞壁的一種組成成分,它們伴隨纖維素而存在,構(gòu)成相鄰細(xì)胞中間層粘結(jié)物,使植物組織細(xì)胞緊緊黏結(jié)在一起。果膠酶(Pectinase)是一類分解果膠質(zhì)酶類的總稱,實(shí)質(zhì)是多聚半乳糖醛酸水解酶,包括原果膠酶,果膠酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶四大類,廣泛存在于植物果實(shí)和微生物中,主要用于食品、釀酒、環(huán)保、醫(yī)藥、紡織及日化用品行業(yè)。

            果膠酶(PG)檢測試劑盒(DNS 比色法)檢測原理是果膠酶水解果膠生成β-半乳糖醛酸,與二硝基水楊酸(DNS)反應(yīng)形成有色化合物,該化合物呈色強(qiáng)度與半乳糖醛酸濃度成正比,于分光光度計 540nm 處測定吸光度,通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較計算出樣品中果膠酶活性,主要用于定量檢測植物組織或果實(shí)中果膠酶,反應(yīng)顏色越深,吸光度越大,果膠酶的活性越強(qiáng)。該試盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

            自備材料:

            1、蒸餾水    

            2、實(shí)驗(yàn)材料:桃子、李子、蘋果、杏等果實(shí)或其他植物組織

            3、電子天平、水果刀或剪刀、研缽或勻漿器、離心管或試管、離心機(jī)、水浴鍋

            4、比色杯、分光光度計

            操作步驟(僅供參考)

            1、果膠酶提?。喝」麑?shí)或其他植物組織,洗凈,擦干,稱取剪碎的新鮮樣品 3g,置于提前 4℃預(yù)冷的研缽或勻漿器,加入 3ml 4℃預(yù)冷的 Pectinase Lysis Buffer,充分研磨或勻漿后轉(zhuǎn)入離心管或試管,410000g 離心 10min,留取上清液,即為果膠酶提取液,4℃保存待用。

            2、稀釋半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)液:取適量的半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml),按下表進(jìn)行稀釋:


            加入物(單位:μl)

            1

            2

            3

            4

            5

            半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)

            20

            40

            60

            80

            100

            Pectinase Lysis Buffer

            80

            60

            40

            20

            0

            半乳糖醛酸濃度(μg/ml)

            200

            400

            600

            800

            1000


             3、加樣:按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡,小心混勻。如果樣品中的果膠酶活性過高,可以減少樣品用量或適    當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定,樣品的檢測最好能設(shè)置 2 平行管,求平均值。


            加入物(單位:ml)

            空白管

            標(biāo)準(zhǔn)管

            對照管

            測定管

            Pectinase Lysis Buffer

            0.3

            半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)(1~5 號管)

            0.3

            果膠酶提取液

            0.2(提前煮沸 5min)

            0.2

            Pectinase Assay Buffer

            0.1

            0.1


            37℃水浴 1h。

            DNS 顯色液

            0.3

            0.3

            0.3

            0.3


             4、測定:沸水浴 5min,自來水中將離心管或試管冷卻至室溫,以蒸餾水稀釋至 2.4ml, 混勻,比色杯光徑 1cm,以空白管調(diào)零,以分光光度計立即系列標(biāo)準(zhǔn)管、對照管、測定管在 540nm 處吸光度。

            注意事項(xiàng):

            1、 取樣量、試劑用量應(yīng)根據(jù)果膠含量適當(dāng)調(diào)整。

            2、 可溶性糖對測定結(jié)果有較大影響,應(yīng)去除樣品中的可溶性糖。

            3、 Pectinase Lysis Buffer 應(yīng)密閉保存,避免有效成分揮發(fā)。

            4、 37℃水浴 1h 后,應(yīng)立即加入 DNS 顯色液。

            5、 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

             

            有效期:6 個月有效;低溫運(yùn)輸,按要求保存。

             




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