簡(jiǎn)石農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞如何
農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)是一種天然具有基因轉(zhuǎn)化能力的革蘭氏陰性菌,其通過(guò)Ti質(zhì)粒上的T-DNA將自身基因轉(zhuǎn)移至植物細(xì)胞并整合到宿主基因組中,誘導(dǎo)植物形成冠癭瘤,這一機(jī)制使其成為植物基因工程的“天然基因工程師”。
一、核心優(yōu)勢(shì):效率與穩(wěn)定性
超高轉(zhuǎn)化效率
1×10^4 cfu/μg DNA——突破性效率保障實(shí)驗(yàn)成功率!
? 更少DNA,更多克?。?/span>微量DNA即可獲得充足陽(yáng)性克隆,降低珍貴樣本損耗。
? 縮短周期:單次轉(zhuǎn)化滿足建庫(kù)、突變體篩選等需求,減少重復(fù)實(shí)驗(yàn),提速50%以上*。
嚴(yán)格質(zhì)量控制,批次間零差異
? 活性保障:每批次細(xì)胞經(jīng)多級(jí)檢測(cè)(如冰浴復(fù)蘇存活率、質(zhì)粒兼容性測(cè)試),確保轉(zhuǎn)化活性≥標(biāo)定值。
? 無(wú)菌認(rèn)證:通過(guò)內(nèi)毒素檢測(cè)與微生物污染篩查,杜絕假陽(yáng)性干擾。
競(jìng)品對(duì)照
二、為何選擇簡(jiǎn)石的感受態(tài)細(xì)胞?
自20世紀(jì)70年代科學(xué)家改造Ti質(zhì)粒(移除致瘤基因、保留T-DNA轉(zhuǎn)移功能)后,農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)革新了植物基因編輯,成為作物改良和功能基因組學(xué)研究的核心工具。而“感受態(tài)細(xì)胞”(Competent Cells)是通過(guò)物理或化學(xué)處理使細(xì)胞膜短暫通透化的工程化細(xì)菌(如農(nóng)桿菌或大腸桿菌),能夠高效吸收并穩(wěn)定攜帶外源DNA(如重組質(zhì)粒),作為基因轉(zhuǎn)化的“高效載體”,其標(biāo)準(zhǔn)化制備(如高轉(zhuǎn)化效率、嚴(yán)格質(zhì)控)大幅提升了基因克隆、載體擴(kuò)增及后續(xù)植物轉(zhuǎn)化的成功率,是連接基因操作與實(shí)際應(yīng)用的橋梁性技術(shù)。
“基因快遞”精準(zhǔn)抵達(dá)
基于農(nóng)桿菌天然T-DNA遞送機(jī)制,適配雙元載體系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)外源基因高效整合至植物基因組,尤其適用于難轉(zhuǎn)化物種(如木本植物、單子葉作物)。
即用型設(shè)計(jì),解放實(shí)驗(yàn)室人力
? 無(wú)需耗時(shí)制備:跳過(guò)活化、電擊等繁瑣步驟,解凍后直接用于共培養(yǎng)。
? 兼容性廣泛:支持pCAMBIA、pGreen等常用載體,匹配多種抗性篩選(如卡那霉素、利福平)。
基因功能研究
快速構(gòu)建過(guò)表達(dá)/RNAi株系,解析抗病、開花調(diào)控等關(guān)鍵基因通路。
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