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            核酸凝膠染料應(yīng)該如何進(jìn)行選擇?

            來(lái)源:上海牧榮生物科技有限公司   2025年03月26日 13:12  

            SPEED Biosystems 擁有一系列核酸凝膠染料,包括用于凝膠前和凝膠后染色的 GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™,以及用于電泳前與核酸混合的 SafeGreen™ 和 SafeRed™ 上樣染料。這些染料是下一代熒光核酸凝膠染料,旨在替代高致突變性溴化乙錠 (EB)。這些染料兼具高靈敏度、低毒性和穩(wěn)定性,優(yōu)于 EB。EB 因其成本低且通常具有足夠的靈敏度而被廣泛用于核酸凝膠染色。然而,EB 具有高度誘變性。與凈化和廢物處理相關(guān)的安全隱患和成本最終會(huì)使染料變得昂貴且使用不便。


            用于凝膠前和凝膠后染色的凝膠染料(GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™)

            優(yōu)勢(shì)

            ★ 比 EB 更安全。Ames 試驗(yàn)和其他試驗(yàn)顯示無(wú)突變性和無(wú)細(xì)胞毒性。

            ★ 常溫下穩(wěn)定。

            ★ 與標(biāo)準(zhǔn)藍(lán)光 LED 和 UV 透射儀兼容。

            ★ 與藍(lán)光一起使用可減少凝膠切除和后續(xù)克隆的誘變。


            核酸凝膠染料應(yīng)該如何進(jìn)行選擇?

            圖 1.使用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的凝膠染色結(jié)果(左圖),以及使用 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 的比較結(jié)果(右圖)。左圖:將 1 kb DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)(NEB,貨號(hào) # N0468S)的兩倍梯度稀釋液以 25 ng、50 ng 和 100 ng(從左到右)的量分分 3 個(gè)泳道上加載到每塊凝膠上,然后用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 進(jìn)行后染色。右圖:結(jié)果顯示 GreenView™ 與 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 具有相似的靈敏度,GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的靈敏度要好得多。

            圖 2.使用 RedView™ 和 GelRed™ 進(jìn)行凝膠染色結(jié)果。將 1 kb DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)品的 2 倍梯度稀釋液以 25 ng、50 ng 和 100 ng(從左到右)的量分裝到 3 個(gè)泳道的每塊凝膠上,然后分別用 RedView™ 和 GelRed™ 進(jìn)行后染色。結(jié)果顯示 RedView™ 與 GelRed™ 具有相似的靈敏度。


            除了比 EB 更安全之外,與 SYBR Safe DNA 凝膠染料相比,GreenView™、GreenView™ Plus 和 RedView™ 的細(xì)胞通透性降低,使其更安全(圖 3)。

            圖 3.使用 SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 進(jìn)行細(xì)胞通透性測(cè)試。Hela 細(xì)胞在 37?使用 1X SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 30 分鐘。

            GreenView Plus 和 RedView 無(wú)法穿透細(xì)胞膜以結(jié)合活細(xì)胞中的 DNA,并且比 SYBR Safe 安全得多,后者可快速進(jìn)入細(xì)胞并對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色。

            如何選擇適合您的 DNA 染色劑?

            GreenView

            GreenView Plus

            GreenView Ultra

            RedView


            SKU

            LYF1001

            LYF1002

            LYF1003

            LYF1004

            Ex/Em (nm)

            488/530

            488/530

            488/530

            488/530

            Nonhazardous/
            Environmentally friendly

            Gel electrophoresis

            dsDNA

            ssDNA



            RNA



            Precast gel staining


            Post-gel staining




            Gel band excision for cloning


            Excitation Source

            Blue light/UV

            Blue light/UV

            Blue light/UV

            UV

            Recommended emission filter

            SYBR filter

            SYBR filter

            SYBR filter

            EB filter


























            凝膠上樣染料(SafeGreen™ 和 SafeRed™)

            優(yōu)勢(shì)

            ★ 在 6X 上樣緩沖液中配制,即用型。

            ★ 安全無(wú)毒,是 EB 的替代品。

            圖 4.使用 SafeGreen™(左圖)和 SafeRed™(右)與 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)預(yù)混合的凝膠染色結(jié)果。

            SafeGreen™ 和 SafeRed™ 經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì),不滲透細(xì)胞膜,從而通過(guò)防止染料進(jìn)入活細(xì)胞來(lái)降低遺傳毒性(圖 5)

            圖 5.使用 SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 進(jìn)行細(xì)胞通透性檢測(cè)。將 Hela 細(xì)胞在 37oC 下與 1X SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 一起孵育 30 分鐘。SafeGreen™ 和 SafeRed™ 無(wú)法穿透細(xì)胞膜結(jié)合活細(xì)胞中的 DNA,比 SYBR Safe™ 安全得多,后者可快速進(jìn)入細(xì)胞并對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色。

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            SafeGreen™ Loading Dye  貨號(hào) LYF1005

            SafeRed™ Loading Dye  貨號(hào) LYF1006



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