一、免疫細胞無血清培養(yǎng)基概述

免疫細胞無血清培養(yǎng)基可用于臍帶血或外周血中分離到的單核細胞向CIK細胞（細胞因子誘導的殺傷細胞）的體外誘導及體外大規(guī)模擴增培養(yǎng)。

二、免疫細胞無血清培養(yǎng)基特點

1、無血清培養(yǎng)基，無添加細胞因子

2、無異源動物成分，化學成分限定培養(yǎng)基

3、培養(yǎng)性能，支持高密度單核細胞培養(yǎng)

三、免疫細胞無血清培養(yǎng)基應用

1、DC細胞、CIK細胞和NK細胞的長期增殖培養(yǎng)

2、PBL細胞和TIL細胞的長期增殖培養(yǎng)

3、單核細胞和巨噬細胞的長期增殖培養(yǎng)

4、T淋巴細胞的長期增殖培養(yǎng)

四、免疫細胞無血清培養(yǎng)基使用方法

1、采集與分離外周血采集外周血，F(xiàn)icoll密度梯度離心分離收集單個核細胞。

2、單個核細胞的接種與誘導活化

1)0d時，繃胞計數(shù)。按細胞密度2x106cell/mL接種至對應體積的培養(yǎng)液中。添加誘導因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。

2)1d時(24小時)，添加誘導因子YC002、YC003、YC004至已經(jīng)接種細胞的培養(yǎng)液中。將YC005添加至未經(jīng)使用的培養(yǎng)基中，待用。

3、細胞的連續(xù)培養(yǎng)與擴增

1)3d時，補入新鮮培養(yǎng)液，調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同時添加新加入培養(yǎng)液體積l10%比例的自體血漿。補液比例大致在1：2左右（原有培養(yǎng)液體積：新加培養(yǎng)液體積）

2)5d時，補入新鮮培養(yǎng)液，調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。補液比例大致在1：3左右。

3)7d時，補入新鮮培養(yǎng)液，調整細胞密度至(06-08）x106cell/mL。補液比例大致在1：2左右。

4)9d時，將剩余培養(yǎng)液全部加入。

4、收獲細胞

培養(yǎng)周期結束后，依據(jù)細胞量收獲細胞。

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